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中性红染色液
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:中性红染色液
英文名称:
产品规格:50ml
发货周期:1~3天
中性红染色液(活细胞染色用)(Neutral Red Staining Solution)是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成红色的染色液。本染色液配制在pH 值为中性,并且和普通的细胞培养液等渗的溶液中,可以用于外周血细胞的活体染色,也可以用于其它活体细胞或组织的染色。中性红的分子式为C15H17IN4,分子量为288.8,CAS Number为553-24-2。
储存条件:4℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期:一年。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
氨磺镍 电镀马免疫球蛋白E(IgE)免疫试剂盒生长抑制因39蛋白抗体Metronidazole 硝唑抗体
氨磺镍 99%,高纯马锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD/SOD2)免疫试剂盒神经膜抗体Methionine adenosyltransferase 蛋氨腺苷转移酶抗体
氢氧化镍 Ni 61%马免疫试剂盒脆性X相关蛋白1抗体Metallothionein 3 金属硫蛋白3抗体
氟化镍 AR马结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)免疫试剂盒F-box蛋白家族FBXO31抗体Metallothionein 3 金属硫蛋白3抗体
氟化镍 CP马窖蛋白Caveolin-1(CAV1)免疫试剂盒卵巢滤泡激素抗体(BHD综合征)Metallothionein 金属硫蛋白抗体
氟化镍 电镀马黄体生成素(LH)免疫试剂盒羊抗人纤维蛋白原抗体Metal ion transporter 拟南介金属离子转运蛋白抗体
碱式碳镍 AR马环腺苷(cAMP)免疫试剂盒FXYD离子转运调节因子7抗体Met Enkephalin 硫氨脑啡肽抗体
碱式碳镍 CP马环鸟苷(cGMP)免疫试剂盒脂肪结合蛋白5抗体(上皮型)MESP1 心血管发育中胚层相关蛋白1抗体
碱式碳镍 99.9% metals basis马过氧化氢酶(CAT)免疫试剂盒脂氧素受体1抗体Mesothelioma 间质蛋白抗体
溴化镍 22.5%水溶液马谷胱甘肽还原酶(GSR)免疫试剂盒半胱氨蛋白酶8相关蛋白2抗体Mesothelin 间皮素抗体
化镍,六水 AR,98%马睾酮(T)免疫试剂盒叉头蛋白F1抗体MEPE 外质化抗体
化镍,六水 CP,97%马促肾上腺皮质激素(ACTH)免疫试剂盒高嗜性粒综合症相关蛋白FIP1L1抗体MEP1A/Meprin alpha/PPHA 肽水解酶抗体
化镍,六水 GR,98%马促卵泡素(FSH)免疫试剂盒叉头蛋白D4MEOX 2 间充质同源盒蛋白2抗体
化镍,六水 ACS马雌激素(E)免疫试剂盒化细丝蛋白A抗体Menin/Men1 Menin抑癌蛋白抗体
化镍,六水 培养马二(MDA)免疫试剂盒化细丝蛋白A抗体membrane glycoprotein E(VZV) 人水痘带状疱疹病gE蛋白抗体
中性红染色液10号染色体开放阅读框81抗体Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人抗浦肯野抗体/抗Yo抗体(PCA-1/Yo)ELISA试剂盒, PCA-1/Yo ELISA
19号染色体开放阅读框47抗体Human GPRC5A(G Protein Coupled Receptor, Family C, Group 5, Member A) ELISA Kit人葡萄球蛋白A(SPA)ELISA试剂盒, SPA ELISA
19号染色体开放阅读框54抗体Human GPR37(G Protein Coupled Receptor 37) ELISA Kit人单氧化酶(MAO)ELISA试剂盒,MAO ELISA
N-乙酰半乳糖糖蛋白3、β-半乳糖转移酶1抗体Human GR(Glutathione Reductase) ELISA Kit人二氢嘧啶酶样2(DPYSL2)ELISA试剂盒,
19号染色体开放阅读框18抗体Human GIF(Gastric Intrinsic Factor) ELISA Kit人球蛋白重链可变区(IgHV)ELISA试剂盒,
19号染色体开放阅读框21抗体Human GPR120(G Protein Coupled Receptor 120) ELISA Kit人SH2携带蛋白(SHC/SLP⁻⁷6)ELISA试剂盒,
19号染色体开放阅读框24抗体Human GLDL(Glycated Low Density Lipoprotein) ELISA Kit人胶原凝集素(Collectin)ELISA试剂盒,
Ⅱ型胶原α1蛋白/软骨钙素抗体Human GJβ1(Gap Junction Protein Beta 1) ELISA Kit大鼠白介素7(IL⁻⁷)ELISA试剂盒,
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