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吖啶橙染色液
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详细内容
中文名称:吖啶橙染色液
英文名称:
产品规格:100T
发货周期:1~3天
橙(Acridine Orange,AO)为一种荧光染料,该染料具有膜通透性,能透过细胞膜,使核DNA和RNA染色。其激发波长为488nm,吸收波长为515nm。它与细胞中DNA和RNA结合量存在差别,复合物可发出不同颜色的荧光,红色荧光为AO-DNA(F>600nm),绿色荧光为AO-RNA或单链DNA(F>530nm)。因此,在荧光显微镜下观察,橙可透过正常细胞膜,使细胞核呈绿色或黄绿色均匀荧光;而在凋亡细胞中,因染色质固缩或断裂为大小不等的片断,形成凋亡小体。橙使其染上致密浓染的黄绿色荧光,或黄绿色碎片颗粒;而坏死细胞黄荧光减弱甚至消失。橙AO常与溴化乙啶EB合用双染,因EB只染死细胞使之产生桔黄色荧光,由此可区分出正常细胞、凋亡细胞及坏死细胞。
储存条件:4℃避光保存。长期保存-20℃避光保存。
有效期:一年。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
乙锌,二水 AR,99.0%猫p27核心抗原(P27)免疫试剂盒F-box蛋白家族FBXO18抗体MIF 巨噬移动抑制因子抗体
氧化锌 AR,99%猫5羟色/血清素/血清(5HT/ST)免疫试剂盒FRG2B蛋白抗体MIER2 中胚层诱导早期反应蛋白2抗体
硫锌,七水 99.995% metals basis马ELISA试剂盒FAM71A蛋白抗体Midnolin isoform Protein 1 中脑核仁蛋白1抗体
碱式碳锌 AR,57.5%马转化生长因子β2(TGFB2)免疫试剂盒FAM83F蛋白抗体MIDN 中脑核仁蛋白抗体
硫铜,五水 高纯马肿瘤坏死因子α(TNF-α)免疫试剂盒FBXL17蛋白抗体Midkine 中期因子/肝素结合生长因子抗体
磺 70%水溶液马孕激素/孕酮(PROG)免疫试剂盒FCHSD1蛋白抗体MID2/RNF60/Midline-2 环指蛋白60抗体
硫镍,七水 GR,99%马吲哚2,3-双加氧酶1(IDO1)免疫试剂盒FBXL5蛋白抗体MID1/Midline-1/RNF59 环指蛋白59抗体
溴化镍 22.5%水溶液马胰腺甘油三酯脂酶(PNLIP)免疫试剂盒FBXL12蛋白抗体MICS1 生长激素诱导跨膜蛋白抗体(源性蛋白2)
溴化镍 99%马血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)免疫试剂盒FBXL3蛋白抗体Microsporidia protien 蜜蜂微孢子虫蛋白抗体
化镍,六水 AR,98%马血纤蛋白原(Fbg)免疫试剂盒F-box蛋白相关蛋白11抗体Microcephalin 1/BRIT1 小脑症因1/认知相关蛋白抗体
三氧化二钴 CP,98.5%马血清淀粉样蛋白A(SAA)免疫试剂盒FGFR1癌因伴侣蛋白2抗体MICB MHC I类链相关蛋白B
三氧化二钴 AR,99.0%马血管内皮生长因子(VEGF)免疫试剂盒成纤维生长因子受体底物2抗体MICA/MHC I MHC I类链相关蛋白A/组织相容性复合物1抗体
氨磺钴 98.5%马血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫试剂盒FNBP1L蛋白抗体MIC1/C18orf8 结肠癌相关蛋白MIC1抗体
乙钴,四水 AR,99.5%马维生素C(VC)免疫试剂盒GATA结合蛋白2伴侣蛋白抗体MIA2 黑色素瘤抑制活性蛋白2抗体
乙钴,四水 ACS马维生素A(VA)免疫试剂盒CD349抗体MHC Class II/MRC OX-6 组织相容性复合体2抗体
吖啶橙染色液磷酸化原癌基因c-kit抗体Human HCCS(Holocytochrome C Synthase) ELISA Kit大鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒,
磷酸化原癌基因c-kit抗体Human HDAC2(Histone Deacetylase 2) ELISA Kit大鼠脱氢表雄酮(DHEA)ELISA试剂盒,
胸腺基质生成素受体抗体Human GUCA2B(Guanylate Cyclase Activator 2B) ELISA Kit大鼠S100B蛋白(S-100B)ELISA试剂盒,
磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体Human GUCA2A(Guanylate Cyclase Activator 2A) ELISA Kit大鼠皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA试剂盒,
磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体Human HBβ(Hemoglobin Beta) ELISA Kit兔组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒,
蛋白磷酸激酶PKC/CPI-17抗体Human HAGH(Hydroxyacylglutathione Hydrolase) ELISA Kit鲑鱼补体蛋白4
磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体Human H-Cadherin(Cadherin, Heart) ELISA Kit吲哚培养基
磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体Human HBμ(Hemoglobin, Mu) ELISA Kit卵黄琼脂基础 加入卵黄,用于厌氧梭状芽孢杆的分离培养
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