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细胞膜红色荧光染料(DiD)
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详细内容
中文名称:细胞膜红色荧光染料(DiD)
英文名称:DiD
产品规格:10mg
发货周期:1~3天
长链二烷基羰花青化合物,特别是Dil,广泛应用于固定和非固定的组织与细胞中,进行顺行或逆行的神经示踪分析。Dil 不会影响细胞的活力、生长以及基本生理特性。
Dil 标记运动神经元,可在培养基条件下持续跟踪长达四周,在体内长达一年。染料通过在质膜中的缓慢横向扩散均匀标记神经元,0.2~0.6mm/每天/固定标本,在活体组织里,可以达到6mm/每天。经过醛固定的组织,Dil 的扩增可以持续长达1~2 年。一般情况下未标记的染料不会向非标记的细胞转移,除非质膜被破坏,比如切片部位。DiD(MW:959.91)
储存:-20℃,避光,有效期12个月。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
醋铈 99.9% metals basis牛神经肽Y(NPY)免疫试剂盒叉头蛋白G1抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/PE PE标记的小鼠抗兔IgM
醋铈 99.99% metals basis牛状腺原氨(T3)免疫试剂盒肿瘤/抗原112抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/HRP 辣根过氧化物酶标记的小鼠抗兔IgM
草铈 98%牛软骨寡聚质蛋白(COMP)免疫试剂盒微管动力调节蛋白FAM82A抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Gold 胶体金标记的小鼠抗兔IgM
草铈 99.9% metals basis牛脂肪球EGF因子蛋白(MFGE8)免疫试剂盒FAM50B蛋白抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/FITC FITC标记的小鼠抗兔IgM
硝镧 AR,99%牛脱氢酶(LDH)免疫试剂盒形成素2抗体(成蛋白)Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy7 Cy7标记的小鼠抗兔IgM
硝镧 99.99% metals basis牛过氧化物酶(LPO)免疫试剂盒脂阀结构蛋白1抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5.5 Cy5.5标记的小鼠抗兔IgM
硝镧 99.9% metals basis牛肉碱棕榈酰转移酶-II(CPT-II)免疫试剂盒成纤维生长因子17抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy5 Cy5标记的小鼠抗兔IgM
硝镧 99.999% metals basis牛肉碱棕榈酰转移酶-Ⅰ(CPT-Ⅰ)免疫试剂盒成纤维生长因子23抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Cy3 Cy3标记的小鼠抗兔IgM
醋镧 99.9% metals basis牛肉碱免疫试剂盒成纤维生长因子20抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Bio 生物素标记的小鼠抗兔IgM
醋镧 99.99% metals basis牛溶菌酶(LZM)免疫试剂盒成纤维生长因子19抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/APC APC标记的小鼠抗兔IgM
(+)二异松蒎烷 60% in Heptane, ca. 1.7mol/L牛特异性蛋白B(PSPB)免疫试剂盒成纤维生长因子22抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/AP 碱性酶(AP)标记的小鼠抗兔IgM
(-)二异松蒎烷 60% in Heptane, ca. 1.7mol/L牛热休克蛋白72(HSP⁻⁷2)免疫试剂盒胎球蛋白AMouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647标记的小鼠抗兔IgM
三仲丁氢化锂 1M THF溶液牛热休克蛋白70(HSP⁻⁷0)免疫试剂盒叉头蛋白L2抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555标记的小鼠抗兔IgM
四正丁四氢铵 95%牛氧化酶(aldehyde oxidases,AO)免疫试剂盒叉头相关转录因子3抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488标记的小鼠抗兔IgM
环三氧烷 1M THF solution牛固酮(ALD)免疫试剂盒铁蛋白抗体Mouse Anti-Rabbit IgM/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350标记的小鼠抗兔IgM
细胞膜红色荧光染料(DiD)1号染色体开放阅读框192抗体Human PEX2(Peroxisomal Biogenesis Factor 2) ELISA Kit人重组激活基因2(RAG-2)ELISA试剂盒,
1号染色体开放阅读框194抗体Human PDE4D(Phosphodiesterase 4D, cAMP Specific) ELISA Kit小鼠硫氧化还原蛋白(Trx)ELISA试剂盒,
1号染色体开放阅读框198抗体Human PDIA2(Protein Disulfide Isomerase A2) ELISA Kit小鼠脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒,
1号染色体开放阅读框21抗体Human PDIA3(Protein Disulfide Isomerase A3) ELISA Kit兔载脂蛋白A1(apo-A1)ELISA试剂盒,
1号染色体开放阅读框216抗体Human PCDHβ16(Protocadherin Beta 16) ELISA KitBDS培养基
1号染色体开放阅读框43抗体Human PCDHγA2(Protocadherin Gamma A2) ELISA KitD-赖氨酸盐酸盐
1号染色体开放阅读框50抗体Human PDIA5(Protein Disulfide Isomerase A5) ELISA Kit阿魏酸 Ferulic Acid
1号染色体开放阅读框49抗体Human PCI(Protein C Inhibitor) ELISA Kit二氢丹参酮 I Dihydrotanshi I
热门标签:细胞膜红色荧光染料,DiD













