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死细胞核染料(碘化丙啶)
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详细内容
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中文名称:死细胞核染料(碘化丙啶)
英文名称:PI
产品规格:20mg|5mg|10mg
发货周期:1~3天
碘化丙啶与DNA 结合,它不具备序列选择性,每4~5 个碱基对进行插入。PI 也可以与RNA 结合,因此在RNA 核酸治疗中,需要区别PI 是与DNA 还是RNA 结合,但PI 一旦与核酸结合,其荧光增强20~30 倍,荧光激发向红色大光位移大约30~40nm,荧光发射向蓝光大位移大约15nm。虽然其摩尔吸光系数比较低,但是PI 具有一个足够打的斯托克斯位移(stokes shift),可以通过合适的光学滤光器来检测到其标记的核DNA 或者标记结合的抗体。PI 适用于荧光显微镜、激光共聚焦扫描显微镜、流式细胞仪以及荧光光度法。
PI 不具备膜渗透性,通常用于多色荧光技术中区分死细胞群体。PI 的复染操作,可以涉及到多种实验应用,如细胞学标记技术、直接或间接地抗体荧光检测、mRNA 表达原位杂交以及特定的细胞结构荧光试剂染色。
储存:-20℃,避光,有效期12个月。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
圣草次苷 ≥98.0% (HPLC)牛雄烯二酮(ASD)免疫试剂盒Fas活化激酶结构域蛋白2抗体MPO/Myeloperoxidase 髓过氧化物酶抗体
甘草 分析标准品,>98% 牛新包虫抗体免疫试剂盒Fas活化激酶结构域蛋白1抗体MPO/c-ANCA 髓过氧化物酶抗体
甘草 93%牛锌金属硫蛋白(Zn-MT)免疫试剂盒F-box蛋白21抗体Mouse IgA 兔抗小鼠IgA抗体
牡荆素葡萄糖苷 98%牛心肌肌钙蛋白T(cTn-T)免疫试剂盒GATA结合蛋白1伴侣蛋白抗体Mouse Anti-rat IgG/RBITC 罗丹明标记的小鼠抗大鼠IgG
L-4-羟异亮氨 98%牛心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)免疫试剂盒胎球蛋白B/Fetuin β抗体Mouse Anti-rat IgG/PE-Cy7 PE-Cy7标记的小鼠抗大鼠IgG
异绿原C 分析标准品,≥98%牛腺病3(ADV3)抗体(IgG)免疫试剂盒叉头蛋白O1抗体Mouse Anti-rat IgG/PE-Cy5.5 PE-Cy5.5标记的小鼠抗大鼠IgG
异绿原A 分析标准品,99%牛纤维蛋白原(Fb)免疫试剂盒铁蛋白重链抗体Mouse Anti-rat IgG/PE-CY5 PE-CY5标记的小鼠抗大鼠IgG
α-倒捻子素 分析标准品,≥98%牛纤连蛋白(FN)免疫试剂盒类固受体复合物蛋白FKBP5抗体Mouse Anti-rat IgG/PE-Cy3 PE-Cy3标记的小鼠抗大鼠IgG
羟积雪草 分析标准品,98%牛纤调蛋白(FMOD)免疫试剂盒纤维性鞘结合蛋白1抗体Mouse Anti-rat IgG/PE PE标记的小鼠抗大鼠IgG
新绿原 分析标准品,≥99%牛色素b-245重链(CYBB)免疫试剂盒纤维生长因子结合蛋白2抗体Mouse Anti-rat IgG/HRP 辣根过氧化物酶标记的小鼠抗大鼠IgG
新绿原 99%牛角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)免疫试剂盒肌动蛋白结合蛋白Fascin3抗体Mouse Anti-rat IgG/Gold 胶体金标记的小鼠抗大鼠IgG
橄榄苦苷 分析标准品,≥98%(HPLC)牛维生素D(VD)免疫试剂盒结构特异性核酶FEN1抗体Mouse Anti-rat IgG/FITC FITC标记的小鼠抗大鼠IgG
番泻苷C 99%牛维生素C(VC)免疫试剂盒FAM61B蛋白抗体Mouse Anti-rat IgG/Cy7 Cy7标记的小鼠抗大鼠IgG
亚麻木酚素 分析标准品,≥98%牛维生素B12(VB12)免疫试剂盒FAM63A蛋白抗体Mouse Anti-rat IgG/Cy5.5 Cy5.5标记的小鼠抗大鼠IgG
雷公藤乙素 分析标准品,≥98%牛维生素A(VA)免疫试剂盒上皮分泌型FAM3C蛋白抗体Mouse Anti-rat IgG/Cy5 Cy5标记的小鼠抗大鼠IgG
死细胞核染料(碘化丙啶)磷酸化热休克蛋白β5/α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体Human PHB(Prohibitin) ELISA Kit罗氏沼虾诺达病(MrNV)ELISA试剂盒,
磷酸化α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体Human PIK3Cβ(Phosphoinositide-3-Kinase Catalytic Beta Polypeptide) ELISA KitWORT 肉汤
磷酸化热休克蛋白β5/α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体Human PK(Pyruvate Kinase, Liver And RBC) ELISA Kit胰 蛋白胨水培养基
1号染色体开放阅读框167抗体Human PLAA(Phospholipase A2 Activating Protein) ELISA Kit改良马丁液体培养基 用于苗制造及生物制品霉无检验
1号染色体开放阅读框168抗体Human PLB(Phospholipase B) ELISA Kit甘草次酸 Glycyrrhetinic Acid
1号染色体开放阅读框170抗体Human PK2(Prokineticin 2) ELISA Kit铋试剂Ⅰ
1号染色体开放阅读框172抗体Human PLCγ1(Phospholipase C Gamma 1) ELISA Kit赖氨酸琼脂糖凝胶4B
1号染色体开放阅读框173抗体Human PLCγ2(Phospholipase C Gamma 2, Phosphatidylinositol Specific) ELISA Kit十五氟辛酸
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:死细胞核染料,碘化丙啶













