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细胞骨架蓝色荧光探针
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:细胞骨架蓝色荧光探针
英文名称:
产品规格:200μL
发货周期:1~3天
本染料是F-肌动蛋白的高亲和力探针,由蘑菇毒素制成,与蓝色荧光染料偶联。以纳米摩尔浓度使用时,鬼笔毒素是方便的探针,可用于对固定和打孔的组织切片、细胞培养物或无细胞实验体系中的F-肌动蛋白进行标记、鉴别和定量。
Ex/Em:350nm/450nm,比抗体染色更优越。适合于固定和通透的样本。
荧光标记的鬼笔环肽与肌动蛋白对于不同的物种,包括植物和动物具有几乎相同的高结合属性。鬼笔环肽结合具有高选择性,而F-肌动蛋白红色荧光。呈现出很少的非特异性染色。本产品可以用于荧光显微镜、微孔板、比色皿。
浓度:200U/mL储存:-20℃,避光,有效期6个月。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
三(二亚苄酮)二钯 Pd 21.5%犬白介素6(IL-6)免疫试剂盒化转录接头蛋白EP300抗体MVD 羟戊脱羧酶抗体
4-苄氧酚 98%犬白介素4(IL-4)免疫试剂盒化转录因子ELK1抗体MUSK 肌肉骨骼受体酪氨激酶抗体
牛蒡子苷元 分析标准品,>98% 犬白介素2(IL-2)免疫试剂盒化转录因子ELK1抗体Musashi 1/Msi1 神经干RNA结合蛋白Musashi1抗体
牛蒡子苷 分析标准品,>98% 犬白介素1β(IL-1β)免疫试剂盒化雌激素受体α抗体MURF3 肌肉特异性环指蛋白3抗体
马兜铃 分析标准品,>98% 犬白介素1α(IL1A)免疫试剂盒化真核翻译起始因子4B抗体MURF3 肌肉特定环指蛋白3抗体
异补骨脂素 分析标准品,>98%犬白介素18(IL-18)免疫试剂盒真核翻译起始因子4B抗体MURF2 肌肉特异性环指蛋白2抗体
桃叶珊瑚苷 分析标准品,≥98%犬白介素15(IL15)免疫试剂盒化转录接头蛋白EP300抗体MuRF1/Trim63 肌肉特异性泛素蛋白连接酶1抗体
白桦脂 分析标准品,>98%犬白介素11(IL-11)免疫试剂盒化上皮癌转化蛋白2抗体MUM1/FLJ14868 突变的黑色素瘤相关抗原1抗体
(+)- 分析标准品,≥98% (GC)犬白介素10(IL-10)免疫试剂盒化真核翻译起始因子4G抗体MUL1/RNF218 E3泛素连接酶MUL1抗体
岩白菜素 分析标准品,>98% 犬白介素1(IL-1)免疫试剂盒表皮生长因子受体5抗体mucin3/Muc3 粘蛋白-3抗体
双去氧姜黄素 分析标准品,>98% 犬癌胚抗原(CEA)免疫试剂盒电子转移黄素蛋白β肽/黄素蛋白抗体mucin 5B/Muc5B 粘蛋白-5B抗体
野百合碱 分析标准品犬γ干扰素(IFN-γ)免疫试剂盒钠通道蛋白α ENaCMucin 4/Muc4 粘蛋白-4抗体
白屈菜红碱 分析标准品,>98% 犬γ氨丁(GABA)免疫试剂盒转录因子E2F8抗体Mucin 4/Muc4 粘蛋白-4抗体
木香烃内酯 分析标准品,>98%犬β内啡肽(β-EP)免疫试剂盒内皮单核激活肽2抗体MUC7 粘蛋白7抗体
二氢丹参酮 分析标准品,≥98%犬β2微球蛋白(BMG/β2-MG)免疫试剂盒外质蛋白2抗体MUC5AC/Mucin 5AC 胃粘液素抗体
细胞骨架蓝色荧光探针周期蛋白依赖性激酶样3抗体Human PP(Pepsin) ELISA Kit人TH糖蛋白(THP)ELISA试剂盒,
肽/天蚕抗肽单克隆抗体Human Pro-MMP-10(Pro-Matrix Metalloproteinase 10) ELISA Kit人β-促脂素(β-LPH)ELISA试剂盒,
第十七号染色体开放阅读框87抗体Human PPAR-γ(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Gamma) ELISA Kit人血清剥夺反应相关蛋白(SDPR)ELISA试剂盒,
降钙素受体抗体Human PP13(Placental Protein13) ELISA Kit人鱼精蛋白1(PRM1)ELISA试剂盒,
补体C2a链多肽抗体Human PPAR-α(Peroxisome ProlifeRator Activated Receptor Alpha) ELISA Kit小鼠肌钙蛋白T(Tn-T)ELISA试剂盒,
CD80抗体Human RIPK2(Receptor TNFRSF Interacting Serine Threonine Kinase 2) ELISA Kit小鼠胰岛素原(PI)ELISA试剂盒,
CD19抗体Human PPOX(Proorphyrinogen Oxidase) ELISA Kit小鼠热休克蛋白40(Hsp-40)ELISA试剂盒,
C-C元件趋化因子26抗体Human PTP1B(protein tyrosine phosphatase 1B) ELISA Kit大鼠白介素21(IL-21)ELISA试剂盒,
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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