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羰化青DiI(神经元示踪剂)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:羰化青DiI(神经元示踪剂)
英文名称:
产品规格:10mg
发货周期:1~3天
长链二烷基羰花青化合物,特别是Dil(分子量933.88),广泛应用于固定和非固定的组织与细胞中,进行顺行或逆行的神经示踪分析。Dil 不会影响细胞的活力、生长以及基本生理特性。Dil 标记运动神经元,可在培养基条件下持续跟踪长达四周,在体内长达一年。染料通过在质膜中的缓慢横向扩散均匀标记神经元,0.2~0.6mm/每天/固定标本,在活体组织里,可以达到6mm/每天。经过醛固定的组织,Dil 的扩增可以持续长达1~2年。一般情况下未标记的染料不会向非标记的细胞转移,除非质膜被破坏,比如切片部位
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
试剂汞 ACS,99.9995% metals basis犬骨成型蛋白7(BMP7)免疫试剂盒化埃兹蛋白抗体MYOM2 肌间蛋白2抗体
化汞 AR,99.5 %(剧品)犬骨成型蛋白2(BMP-2)免疫试剂盒嗜性粒阳离子蛋白抗体MYOM1 肌间蛋白1抗体
化汞 ACS(剧品)犬钩端螺旋体IgG(Leptospira)免疫试剂盒E1A样分化抑制因子3抗体Myoglobin 肌红蛋白抗体
化汞 AR,99.5%(剧品)犬弓形虫循环抗原(TCA)免疫试剂盒骨骼肌烯化酶抗体MyoGEF 肌球蛋白相互作用G蛋白交换因子抗体
化汞 CP,99.0%(剧品)犬睾酮(T)免疫试剂盒真核翻译起始因子2C1抗体MYOG/Myogenin 肌红蛋白抗体(肌生成素)
硝汞 AR,98.5%(剧品)犬高迁移率族蛋白A2(HMGA-2)免疫试剂盒化eIF4E结合蛋白抗体MyoD1/Myf3 肌原调节蛋白抗体
硝汞 CP,98.0%(剧品)犬高迁移率族蛋白A1(HMGA-1)免疫试剂盒附睾蛋白酶抑制蛋白Myocardin 促血管平滑肌分化因子抗体
硝汞 GR,99.0%(剧品)犬高尔体膜蛋白1(GOLM1)免疫试剂盒内皮素B受体抗体MYLK3 肌球蛋白轻链激酶3抗体
红色化汞 AR,99.5%(剧品)犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)免疫试剂盒脂多糖抗体MYLK2 肌球蛋白轻链激酶2抗体
黄色化汞 AR,99.5%(剧品)犬肝碱性酶(L-ALP)免疫试剂盒GLP1类似蛋白Exendin4抗体MYLIP/Idol 低密度脂蛋白受体的诱导降解蛋白抗体
乙汞 AR,98.0%(剧品)犬甘油-3-脱氢酶(GAPDH)免疫试剂盒化真核翻译起始因子4B抗体MYL9 肌球蛋白轻链9抗体
AR,99.5%(剧品)犬干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫试剂盒上皮癌转化蛋白2抗体MYL7 肌球蛋白轻链7抗体
CP,99.0%(剧品)犬泛素蛋白(Ub)免疫试剂盒化转录因子E2F-1抗体MYL6 肌球蛋白轻链6抗体
硝亚汞 CP,98% 犬儿茶酚抑素(CAT)免疫试剂盒化转录因子E2F-1抗体MYL3/Myosin light chain 3 肌球蛋白轻链3抗体
汞溴红 24~27%犬多肽YY(PYY)免疫试剂盒化表皮生长因子受体抗体MYH9 肌球蛋白重链9抗体
羰化青DiI(神经元示踪剂)CD59抗体Human PRSS23(Protease, Serine 23) ELISA Kit鱼促黄体
畸胎瘤衍化生长因子抗体(N端)Human RB1(Retinoblastoma Protein 1) ELISA Kit5-羟基-DL-色氨酸
钙激活蛋白酶14抗体Human PRSS33(Protease, Serine 33) ELISA Kit贝萼皂苷元 Bayogenin
角蛋白18抗体(C端)Human PTGIS(Prostaglandin I Synthase) ELISA KitNa-对甲苯磺酰-L-苯丙氨酸氯甲基酮
7型胶原抗体Human REPIN1(Replication Initiator 1) ELISA Kit朝藿定C Epimedin C
磷酸化β 连环素蛋白抗体Human PTP1B(protein tyrosine phosphatase 1B) ELISA KitFmoc-L-羟脯氨酸
原癌蛋白CBL2抗体Human RIPK2(Receptor TNFRSF Interacting Serine Threonine Kinase 2) ELISA Kit二氢欧山芹醇当归酸酯 Columbianadin
信号调节蛋白α抗体Human RLN2(Relaxin-2) ELISA Kit罗汉果皂苷IV Mogroside IV
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