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尼氏小体染色液
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详细内容
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中文名称:尼氏小体染色液
英文名称:Nissl body Staining Solution
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
尼氏体(Nissl body)或称尼氏小体是分布于神经细胞胞质内的三角形或椭圆形小块状物质,能被碱性染料如硫堇、亚甲蓝、甲蓝和焦油紫等染料染成紫蓝色。各种神经细胞内都含有尼氏体,但其形状、数量、分布位置常常不同。尼氏体也存在于树突中,但不在于轴突和包体的轴丘。另外,尼氏体会因为生理状态的变化而变化,尼氏体是神经元内合成蛋白质合成的重要部位,当神经元受到刺激后,包体内尼氏体会明显减少。
尼氏染色液(Nissl Stain,焦油紫法)采用焦油紫(Cresyl violet)作为核心染料,焦油紫具有感光作用,能够很好地显示尼氏体变化。主要优点是操作简便、染色稳定、适用范围广,可用于石蜡组织切片的尼氏物质、神经元等的染色,尼氏体的存在和消失是神经细胞是否受损的重要指标,当发生脑炎、脑缺血、轴突反应等情况时,尼氏体会发生溶解甚至消失。
组份:
焦油紫染色液 100mL
分色液 100mL
操作步骤(仅供参考):
1. 新鲜组织固定于乙醇、Carnoy 固定液或中性福尔马林溶液后,常规脱水包埋。
2. 切片厚5μm(注意3),常规脱蜡至水。
3. 切片入焦油紫染色液中,将染缸置于37℃温箱浸染10-30min。
4. 蒸馏水冲洗。
5. 入分色液中分化10s-20s,在显微镜下观察至背景接近于无色为止。
6. 无水乙醇迅速脱水。二甲苯透明,中性树胶封固。
7. 尼氏体:紫色;细胞核:淡紫色;细胞质:淡紫色。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
铑粉 99.99% metals basis犬肾上腺素(EPI)免疫试剂盒EFHD1蛋白抗体NDUFA9 NDUFA9蛋白抗体
铑 99.9%犬神经型一氧化氮合成酶(nNOS)免疫试剂盒突触结合蛋白2抗体NDUFA8 NADH脱氢酶α家族8抗体
铑黑 99.9% metals basis犬状腺原氨(T3)免疫试剂盒核苷焦酶2抗体NDUFA10 NADH氧化还原酶辅酶10抗体
铑粉 99.95% metals basis犬软骨寡聚质蛋白(COMP)免疫试剂盒长链烯脂酰辅酶A水化酶抗体NDUFA1 NADH氧化还原酶辅酶1抗体
硝银 AR,99.8%犬热休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)免疫试剂盒神经元,肌肉特异性烯化酶抗体NDST1 NDST1蛋白抗体
色素C 95%犬热休克蛋白70(HSP⁻⁷0)免疫试剂盒内皮分化型G蛋白偶联受体3抗体NDRG4 抑癌因NDRG4抗体
聚烯 熔融指数 0.5g/10min犬热休克蛋白60,线粒体(HSPD1/Hsp-60)免疫试剂盒发育相关蛋白ERCC6L抗体(乙致畸因子)NDRG3 抑癌因NDRG3抗体
聚烯 熔融指数 4g/10min犬固酮(ALD)免疫试剂盒猪源产肠素性K99抗体NDRG2 抑癌因NDRG2抗体
聚烯 熔融指数 12g/10min犬列腺特异性抗原(PSA)免疫试剂盒α内磺肽抗体NDRG1/Cap43 分化相关因NDRG1抗体
聚烯 熔融指数 35g/10min犬列腺素F2α(PGF2α)免疫试剂盒化转录因子E2F-1抗体NDE1 核分布因E同源蛋白1抗体
聚烯 熔融指数 2.2g/10min犬列腺素E2(PGE2)免疫试剂盒表皮生长因子样激素受体1抗体NCX3 钠钙交换蛋白3抗体
聚烯 熔融指数 0.3g/10min (1.3 @5kg 犬白蛋白(PA)免疫试剂盒CREB结合蛋白p300抗体NCX2/SLC8A2 钠钙交换蛋白2抗体
化金(III) 水合物 Au ≥48%犬葡萄糖-6-酶(G6PC)免疫试剂盒EB病LMP-2A蛋白抗体NCX1/SLC8A1 钠钙交换蛋白1抗体
金 48~50% Au basis犬皮质酮/肾上腺酮(CORT)免疫试剂盒EB病核抗原1抗体NCoR2 核受体辅助抑制因子2抗体
二二氨钯 Pd ≥50% 犬皮质(Cortisol)免疫试剂盒化雌激素受体β抗体NCoR1 核受体辅助抑制因子1抗体
尼氏小体染色液软骨糖蛋白39抗体Human sTREM-1(soluble Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells-1) ELISA Kit人基质金属蛋白酶11(MMP11)ELISA试剂盒,
癌胚抗原抗体Human SMN1(Survival of Motor Neuron 1, omeric) ELISA Kit人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA试剂盒,
癌胚抗原相关粘附分子8抗体Human STUB1(E3 ubiquitin-protein ligase CHIP) ELISA Kit人鸟苷酸解离抑制因子(GDI)ELISA试剂盒,
C型钠尿肽抗体Human SMRP(Soluble Mesothelin Related Peptide) ELISA Kit人血小板生成素(TPO)ELISA试剂盒,
组织蛋白酶K抗体Human SUMO2(Small Ubiquitin Related Modifier 2) ELISA Kit大鼠血栓体蛋白(TpP)ELISA试剂盒,
组织蛋白酶D抗体Human SERT(Serotonin Transporter) ELISA Kit大鼠艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA试剂盒,
组织蛋白酶H抗体Human sFMC(Soluble Fibrin Monomer Complex) ELISA Kit大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA试剂盒,
磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体Human Anti HCV(Hepatitis C Virus Antibody) ELISA Kit乙酰肝素酶(HPA)ELISA试剂盒--动物,人
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:尼氏小体,染色液













