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内质网红色荧光探针(ER-Tracker Red)
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详细内容
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中文名称:内质网红色荧光探针(ER-Tracker Red)
英文名称:
产品规格:20μL
发货周期:1~3天
ER-Red 染料是细胞渗透性的活细胞染料,对内质网(ER) 有高度选择性;如用手册提供的方法进行染色,染色图案在固定后部分保留。该染料含绿色荧光BODIPY:emoji: TR 染料和格列本脲。格列本脲(优降糖)能结合到内质网上突出的ATP-敏感K+ 通道的磺脲类受体上;格列本脲的药理学活性可能影响内质网功能。某些特化细胞中磺脲类受体的可变表达可能导致非内质网标记。
浓度:1mM in DMSO
分子式:C44H42BClF2N6O7S2
分子量:915.2316
建议工作浓度:1μM
储存:-20℃,避光,有效期6个月。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
天然辣椒碱 Nature,≥50% (HPLC)人Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)免疫试剂盒类表皮生长因子域7抗体NHEDC2 线粒体钠/氢交换蛋白质2抗体
天然辣椒碱 Nature,≥95% (HPLC)人1型1-鞘氨受体(S1P1)免疫试剂盒α弹性蛋白抗体NHE1/APNH1 钠氢通道蛋白抗体
α-藏花素 分析标准品,≥98%人17-酮类固(17-KS)免疫试剂盒黄热病包膜糖蛋白抗体NGX6 鼻咽癌相关因6抗体
硫黄连碱 分析标准品,≥95%人17-羟孕烯酮免疫试剂盒HER2受体抗体NGN3/Neurogenin 3 神经元素3抗体
轮环藤碱 分析标准品,≥98%人17羟孕酮(17-OHP)免疫试剂盒转录因子E2F-4抗体NGN1/Neurogenin 1 神经元素1抗体
蝙蝠葛碱 分析标准品,≥98%人17羟皮质类固(17-OHCS)免疫试剂盒化表皮生长因子受体抗体NGF-β 神经生长因子β抗体
哈巴俄甙 分析标准品,≥98%人17-α-羟化酶(17-α-OH)免疫试剂盒化表皮生长因子受体抗体NGFR/p75NTR 神经生长因子受体抗体
异钩藤碱 分析标准品,≥98%人16α羟雌酮1(16-α OHE-1)免疫试剂盒化表皮生长因子受体抗体NGB/neuroglobin 脑红蛋白/神经血红蛋白/神经球蛋白抗体
异绿原B 分析标准品,≥98%人15-羟列腺素脱氢酶(15-PGDH)免疫试剂盒化埃兹蛋白抗体NGALR/Slc22A17 可溶性载质转运蛋白22A17抗体
异莲心碱 分析标准品,≥98%人15-epi-氧脂素 A4(15-epi-LXA4)免疫试剂盒化埃兹蛋白抗体NGAL/Lipocalin 2 脂质运载蛋白抗体
蒙花苷 分析标准品,≥98%人14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)免疫试剂盒化转录因子ELK1抗体NG2/CSPG4 黑色素瘤硫软骨素蛋白多糖4抗体
木兰脂素 分析标准品,≥98%人12-脂氧化酶/脂加氧酶(LOX-12)免疫试剂盒化酪氨蛋白激酶A2受体抗体NG2 硫软骨素蛋白多糖4/黑色素瘤相关蛋白抗体
莲心碱 分析标准品,≥98%人12羟二十烷四烯(12-HETE)免疫试剂盒Ephrin B抗体NF-κB p105/p50(Phospho-Ser373) 化核因子p50/k因结合核因子抗体
盐巴马汀 97% 人11-脱氧皮质免疫试剂盒化Ephrin B抗体NFX1 核转录因子X盒结合蛋白1抗体
盐巴马汀 分析标准品人11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)免疫试剂盒化Ephrin B抗体NF-M/Neurofilament M 中分子量神经丝蛋白抗体
内质网红色荧光探针(ER-Tracker Red)CD13氨肽酶N抗体Human TP/TXA2R(Thromboxane Receptor) ELISA Kit霍乱双糖铁琼脂(KIA)(GB标准)
巨噬炎性蛋白MIP-3a抗体Human TP(Thymidine Phosphorylase) ELISA Kit胰酪胨大豆酵母浸膏肉汤(TSB-YE) 用于单增李氏增培养(SN、GB标准)
间隙连接蛋白32抗体Human TP5(Thymopentin) ELISA KitL-天冬氨酸
C端结合蛋白1抗体Human Total P53(Tumor Protein p53) ELISA KitL-酪氨酸
高分子量角蛋白抗体Human TNKS1(Tankyrase 1) ELISA Kit穿心莲内酯,穿心莲乙素 Andrographolide
22号染色体开放阅读框39抗体Human TNKS2(Tankyrase 2) ELISA KitCBZ-L-苯丙氨酸
周期素G抗体Human TNNC2(Troponin C Type 2) ELISA Kit人大肠癌一抗原3(CCSA-3)ELISA试剂盒,CCSA-3 ELISA kit
Crk p38抗体Human TNPO1(Transportin 1) ELISA Kit人非小肺癌抗原(LTA)ELISA试剂盒,LTA ELISA kit
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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