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伊红染液
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:伊红染液
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
伊红为一种红色的酸性染料,可将细胞质和细胞间质染为粉红色。水溶性伊红组织学上用于上皮细胞、肌肉纤维和细胞浆染色。微生物学实验中,用于鉴别产酸性细菌的一种培养基添加剂。
染色的时间长短需依据:染剂对细胞、组织的染色作用,室温条件,涂片厚薄等进行调节。所以在染色时必须使用显微镜观察染色程度以利掌握时间。
操作方法
1. 涂片放空气中自然干燥,甲醇固定5 分钟,自来水小水流洗去固定液。
2. 滴加伊红染液染色2 分钟,流水洗去多余染液,滤纸吸干水分,镜检。
3. 镜检结果:胞浆呈红色,红细胞呈桔红色,其它成分呈深浅不同红色。
储存:室温避光,有效期一年。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
荭草苷 分析标准品,≥99%人Ⅲ型胶原(HPCⅢ)免疫试剂盒早期B淋巴因子2抗体Nkx2.5/Cardiac-specific homeobox 1 心脏特异性同源盒转录因子NKX2.5抗体
千层纸素A 分析标准品,≥98%人Ⅲ型胶原蛋白(COL Ⅲ)免疫试剂盒ELAVL2蛋白抗体NKR/Neurokin B receptor 神经激肽B受体抗体
紫草素 分析标准品,≥97%人Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)免疫试剂盒ELAVL2+ELAVL4蛋白抗体NKG2D/CD314/KLRK1 NK受体2D抗体
毛蕊花糖苷 分析标准品人3氧代5α类固4脱氢酶2(SRD5A2)免疫试剂盒同源盒蛋白转录因子EN1抗体NKG2C NK受体2C抗体
汉黄芩甙 分析标准品,≥98%人3型1-鞘氨受体(S1P3)免疫试剂盒转录因子ER81蛋白抗体NKG2A NK受体2A抗体
花椒酚 分析标准品,≥98%人3-硝酪氨(3-NT)免疫试剂盒谷氨受体KA1抗体NKB 神经激肽B抗体
9-蒽 99%人3-羟-3-戊二酰辅酶A合酶1(HMGCS1)免疫试剂盒真核翻译起始因子3K抗体NKA 神经激肽A抗体
9-蒽 98%人3-葡萄糖苷孕二(PdG)免疫试剂盒早期生长反应蛋白3抗体NK-2R 神经激肽A受体/K物质受体抗体
9-蒽 98%人Ⅱ型胶原羧端肽(PⅡCP)免疫试剂盒EMSY蛋白抗体Nitrotyrosine 硝酪氨抗体
二 AR,98%人Ⅱ型胶原N端肽(PⅡNP)免疫试剂盒FBXO36 F-box蛋白相关蛋白36抗体NIT2 NIT2蛋白抗体
二 GR,99%人Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)免疫试剂盒CAST1蛋白抗体NIT1 水解酶1抗体
9-芴 99% 人Ⅱ型胶原交联C端肽(CTX-Ⅱ)免疫试剂盒RAB6蛋白抗体NIS 钠转运体蛋白抗体
9-芴酮 99%人Ⅱ型胶原代谢产物C2C(C2C)免疫试剂盒皮卡丘素抗体NIRF/RNF107 环指蛋白107抗体
2-(4-羟)乙 98%人Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)免疫试剂盒ELAVL4蛋白抗体NIR2 膜脂转移蛋白1抗体
环已 CP,98%人Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)免疫试剂盒表皮生长因子样激素受体1NIR1/RDGBA3 膜相关脂转运蛋白抗体
伊红染液趋化因子受体1抗体Human TPPP(Tubulin Polymerization Promoting Protein) ELISA KitPfu酶
磷酸化原癌基因c-Raf抗体Human TrxR1(Thioredoxin Reductase 1) ELISA Kit人载脂蛋白H(Apo-H)ELISA试剂盒, Apo-H ELISA
磷酸化致癌基因C-Myc抗体Human TRY(Trypsin) ELISA Kit人基质金属蛋白酶1(MMP-1)ELISA试剂盒,
CD33抗体Human TSHRAb(Thyroid Stimulating Hormone Receptor Antidoby) ELISA Kit人肾上腺皮质抗体(ACA)ELISA试剂盒,
磷酸化原癌基因c-kit抗体Human TSP-1(Thrombospondin-1) ELISA Kit人热休克因子1(HSF-1)ELISA试剂盒,
磷酸化原癌基因c-Jun抗体Human ucOC(Undercarboxylated Osteocalcin) ELISA Kit人髓样分化因子初次应答基因88(MYD88)ELISA试剂盒,
氯离子通道蛋白3抗体Human UBE1L(Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein) ELISA Kit小鼠中性粒明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒,
磷酸化周期素E抗体Human TP63(Tumor Protein p63) ELISA Kit小鼠肾上腺素能a1A受体(ADRA1A)ELISA试剂盒,
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