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结晶紫染色液
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:结晶紫染色液
英文名称:
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
结晶紫染色液是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成深紫色的染色液。结晶紫是一种碱性染料,可以和细胞核中的DNA 结合,从而产生细胞核染色。本产品至少可以染色200 个样品。
组成成份:
5×结晶紫染色液 20mL
稀释液 80mL
注意事项:
需自备4%多聚。如果需要脱水、透明和封片处理,还需自备二甲苯,中性树胶或其它封片剂。如果样品是石蜡切片,需自备70%和90%乙醇,无水乙醇以及二甲苯。
一次使用本试剂盒时建议先取1-2 个样品做预实验。
结晶紫对人体有害,请注意适当防护,为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
储存:RT避光,有效期一年。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
异丁酮 AR,99.0%人ADP-核糖化因子5(ARF5)免疫试剂盒内皮特异性分子1抗体Nogo R 轴索过度生长抑制因子受体/Nogo受体抗体
异丁酮 standard for GC, ≥99.5% (GC)人ADP-核糖化因子4(ARF4)免疫试剂盒真核翻译起始因子3F抗体Noggin 指(趾)关节粘连NOG蛋白抗体
新戊二 99%人ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1元4(ADAMTS4)免疫试剂盒真核翻译起始因子3H抗体Nociceptin receptor 孤菲肽受体/痛敏肽受体抗体
烯十八烷酯 96%人8异列腺素F2α(8-iso-PGF2a)免疫试剂盒真核翻译起始因子4G抗体Nociceptin 孤菲肽/痛敏肽抗体
三羟烷 98%人8异列腺素(8-iso-PG)免疫试剂盒β4整合素结合蛋白抗体NOC3L/FAD24 脂肪分化因子24
2,5-二 97%人8-异构列腺素F2α(8-epi-PGF2α)免疫试剂盒食道癌相关因4蛋白抗体NOC2L NOC2家族样蛋白抗体
3,4-二氢-2H-吡喃 98%人8羟脱氧鸟苷(8-OHdG)免疫试剂盒红生成素抗体NNT 烟酰核苷转氢酶抗体
2,3-二 99%人8-羟鸟嘌呤DNA糖苷酶(OGG1)免疫试剂盒胞浆环氧化物水解酶抗体NNP1/RRP1 like protein 新型核蛋白质1抗体
四氢吡喃 99%人6酮列腺素F1a(6-keto-PGF1a)免疫试剂盒雌激素受体相关蛋白3抗体nNos/NOS-1 一氧化氮合成酶-1抗体(神经型)
芦荟宁 分析标准品,≥99%人6酮列腺素(6-K-PG)免疫试剂盒雌激素相关受体β抗体NNF1R/PMF1 多调控因子1抗体
乙酯 AR,99% 人6-羟多巴(6-OHDA)免疫试剂盒上皮膜蛋白2抗体n-Myc 致癌因n-Myc抗体
芦荟宁 分析标准品,≥99%人60S核糖体蛋白L36a-样(RPL36AL)免疫试剂盒固羟化酶单加氧酶1抗体NMT2 肉豆蔻酰转移酶2-N端肽抗体
脱水羊藿素 分析标准品,≥99%(HPLC)人60S核糖体蛋白L17(RPL17)免疫试剂盒端粒酶结合蛋白EST1A抗体NMT1 豆蔻酰转移酶1抗体
乙龙脑酯 分析标准品人5-羟色受体6(HTR6)免疫试剂盒组蛋白赖氨N-EZH1抗体NMP-22 核质蛋白22
分析标准品(剧品)人5羟色/血清素/血清(5HT/ST)抗体(IgM)免疫试剂盒上皮间质相互作用蛋白1抗体NME6/IPIA ALPHA P53诱导凋亡抑制蛋白α抗体
结晶紫染色液克仑特罗/瘦肉精抗体Human α1-AT(Alpha 1-Antitrypsin) ELISA Kit人内皮脂肪酶(EL)ELISA试剂盒,EL ELISA
6号染色体开放阅读框151抗体Human α2-AP(α2-Antiplasmin) ELISA Kit人山梨醇脱氢酶(SDH)ELISA试剂盒,
15号染色体开放阅读框52抗体Human αHSP(Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein) ELISA Kit人类风湿因子(RF)ELISA试剂盒,
2号染色体开放阅读框89抗体Human β-actin(Beta actin) ELISA Kit人补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒,
BCL10结合蛋白和激活核转录因子抗体Human ACP(Acid phosphatase) ELISA Kit小鼠巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒,
凋亡加强结构域蛋白15抗体Human MBP(myelin basic protein) ELISA Kit小鼠嗜酸性粒阳离子蛋白(ECP)ELISA试剂盒,
慢性白血病缺失基因6蛋白抗体Human SOCS4(Suppressor Of Cytokine Signaling 4) ELISA Kit小鼠血管紧张素转化酶(ACE)ELISA试剂盒,
13号染色体开放阅读框38抗体Human AA(Arachidonic Acid) ELISA Kit小鼠抗促甲状腺素受体抗体(TRAb)ELISA试剂盒,
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