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茜素红染色液(ph4.2)
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:茜素红染色液(ph4.2)
英文名称:
产品规格:10ml
发货周期:1~3天
本产品主要适用于动物原生代或培养细胞的钙沉积和钙化结节检测。广泛用于骨细胞或组织病理生理的研究。
茜素红S 是一种蒽醌衍生物:9,10-二氢-3,4-二羟基-9,10-二氧代-2-蒽磺酸单钠盐,又称媒介红3(Mordant Red3)或茜素磺酸钠。其分子式为C14H7NaO7S,分子量为342.25。茜素红和钙离子以鳌和方式形成复合物,用以识别组织细胞的钙盐成分。钙盐变化是骨细胞增殖分化和骨组织成骨潜能的标志之一。通过茜红素染色,产生桔红色沉积,但会受到其它金属元素的干扰。
注意:
1.临用将茜素红染色液B 以超纯水稀释十倍,待用(通风橱内操作)。
2.将9mL 茜素红S 染色液A 与1mL 稀释后的茜素红染色液B 完全混合,即得到1%的茜素红S 染色工作液,pH6.3 左右。制备好的染色工作液在2-8℃,避光条件下可保存1 月。
3.以6 孔板为例,每孔孵育的染色工作液为500μL,本试剂盒可以做20tests;以普通切片和96 孔细胞为例,每张玻片孵育的染色工作液为100μL,本试剂盒可以做100tests。
储存:2~8℃,有效期3个月。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
尼日利亚菌素钠 98%人CD4分子(CD4)免疫试剂盒早期内吞体相关蛋白1抗体NSDHL 类固脱氢酶样蛋白NSDHL抗体
寡霉素A 95%人CD45分子(CD45)免疫试剂盒胞吞调控蛋白Eps15抗体NSBP1 核小体结合蛋白1抗体
寡霉素B 80%人CD44分子(CD44)免疫试剂盒真核翻译起始因子4E抗体NS5ATP9/KIAA0101 型肝炎病非结构蛋白5A反式激活蛋白9抗体
赭曲素A 98%人CD44变体6(CD44-v6)免疫试剂盒核输出蛋白5抗体NRXN3 轴突蛋白3抗体
氨核苷嘌呤霉素 98%人CD3分子(CD3)免疫试剂盒肠致病性抗体NRSF/REST 神经元抑制蛋白抗体
根赤壳菌素 98%人CD34分子(CD34)免疫试剂盒E4F转录因子1抗体NRP1/CD304 神经纤毛蛋白1抗体
星形孢菌素 98%人CD30分子(CD30)免疫试剂盒睾酮调节凋亡诱导和肿瘤抑制因抗体Nrn1/Cpg15/Neuritin 转化神经突起蛋白抗体
柄曲菌素 98%人CD22分子(CD22)免疫试剂盒聚合酶延伸因子2抗体NRIP 雄激素受体复合物相关蛋白抗体(核受体相互作用蛋白)
柄曲菌素 分析标准品人CD209分子(CD209)免疫试剂盒聚合酶延伸因子抗体NRH2 死亡结构域蛋白NRH2抗体
链黑霉素 98%人CD19分子(CD19)免疫试剂盒神经生长因子调控抑制蛋白抗体NRG3 神经调节蛋白3抗体
衣霉素 98%人CD15分子(CD15)免疫试剂盒内皮分化鞘脂G蛋白偶联受体1抗体NRG1/HRG beta 1 癌分化因子P45抗体 Heregulinβ
硫藤黄素 95% 人CD147分子(CD147)免疫试剂盒红分化相关因子1抗体Nrf2 核因子2相关因子2抗体
缬氨霉素 ≥98% (TLC), ≥95% (HPLC), solid人CD146分子(CD146)免疫试剂盒微管相关蛋白样蛋白3抗体NRF-1 核呼吸因子-1抗体
蛎灰菌素A 95%人CD134分子(CD134)免疫试剂盒内皮抑素/内皮他丁抗体NRAS 原癌因N-Ras抗体
渥曼青霉素 98%人CD117分子(CD117)免疫试剂盒雌激素受体β抗体NR2F2/NR2F1 载脂蛋白AI调节蛋白1抗体
茜素红染色液(ph4.2)12号染色体开放阅读框54抗体Human MFN2(Mitofusin-2) ELISA Kit大鼠白介素32(IL-32)ELISA试剂盒,
磷酸化钙调节素抗体Human ILDR2(Immunoglobulin-like domain-containing receptor 2) ELISA Kit大鼠可溶性Toll样受体6(sTLR6)ELISA试剂盒,
分裂相关蛋白CSTF64抗体Human NPY(Neuropeptide Y) ELISA Kit大鼠补体片断5a(C5a)ELISA试剂盒,
磷酸化分裂相关蛋白CSTF64抗体Human VDAC1(Voltage-dependent anion-selective channel protein 1) ELISA Kit大鼠上皮中性粒活化肽78(ENA⁻⁷8/CXCL5)ELISA试剂盒,
磷酸化分裂相关蛋白CSTF64抗体Human TP53 antibody(p53 antibody) ELISA Kit大鼠血管生长素(ANG)ELISA试剂盒,
CD3抗体Human Galactose-Deficient IgA1(Galactose-Deficient IgA1) ELISA Kit大鼠可溶性瘦素受体(sLR)ELISA试剂盒,
CD4抗体Human ENK(Enkephalin) ELISA Kit玉米粉琼脂
白共同抗原抗体Human β-actin(Beta actin) ELISA Kit改良沙氏琼脂培养基 用于真检测
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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