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瑞氏-姬姆萨复合染液
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:瑞氏-姬姆萨复合染液
英文名称:
产品规格:250ml×3
发货周期:1~3天
瑞氏-姬姆萨染液主要应用于血液和骨髓涂片染色。
试剂组成:
试剂一:250ml*1 瓶
试剂二:250ml*2 瓶
操作步骤:
1. 平置血涂片于染色架上,滴加试剂一3-5 滴,使其迅速盖满血膜,染色1 分钟左右,以固定血片。
2. 不要倒丢试剂一,直接滴加试剂二6-10 滴,轻摇玻片或用洗耳球对准血涂片吹气使染液充分混合,染5-8分钟。
3. 水洗30 分钟,待干后镜检。
染色结果:
1. 红细胞呈浅红色,中央稍淡而略有蝶形态。
2. 白细胞系统清晰易分,细胞膜清晰呈紫黑色,细胞核着色呈深浅不同的紫红色,胞浆中各种颗粒区分明显。?其中中性粒细胞浆中颗粒呈淡紫红色,嗜酸粒细胞浆中颗粒呈桔红色、嗜碱性粒细胞胞浆中颗粒呈蓝褐色。?单核细胞的胞浆呈灰蓝色,胞浆中颗粒呈细小淡紫红色或蓝紫色。?淋巴细胞胞浆呈淡蓝色。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
链脲菌素 98%人DNA转移酶1(DNMT1)免疫试剂盒微管相关蛋白EB家族3抗体NUDC 核分离因C蛋白抗体
西罗莫司 分析标准品,≥98%人DnaJ同源亚科B成员1(DNAJB1/DNAJ1/HDJ1/HSPF1)免疫试剂盒真核翻译起始因子5抗体Nucleostemin 核干因子抗体(鸟嘌呤核苷结合蛋白3)
妥布霉素 Potency ≥900 μG/mg,98%人Dickkopf 3(DKK3)免疫试剂盒遗传性列腺癌蛋白2抗体Nucleoprotein/NP A型流感病核蛋白抗体
魏因勒卜链接剂 98%人Dickkopf 1(DKK1)免疫试剂盒化丝裂原活化蛋白激酶1抗体Nucleoprotein TPR 核蛋白易位启动子区域TPR抗体
Apicidin 98%人Dicer-1 免疫试剂盒化丝裂原活化蛋白激酶1抗体Nucleoporin p62 核孔糖蛋白P62抗体
茴香霉素 97%人DAB2互作蛋白(DAB2IP)免疫试剂盒化丝裂原活化蛋白激酶1抗体Nucleophosmin 核仁蛋白抗体
阿非科林 98%人C型凝集素结构域家族4成员E(CLEC4E)免疫试剂盒染色体区域稳定蛋白/核输出蛋白1/染色体区域稳定必需蛋白抗体Nucleolin/C23 核仁蛋白C23抗体
巴佛洛霉素A1 95%人C肽(C-Peptide)免疫试剂盒上皮微管相关蛋白7抗体Nucleolar protein 3/Apoptosis repressor with CARD 核仁蛋白3抗体
巴佛洛霉素/B1 80%人C多肽(CP)免疫试剂盒碱性鞘脂酶7抗体Nuclear Matrix Protein p84/NMP84 核质p84蛋白抗体
疏螺旋体素 95%人CXC趋化因子受体7(CXCR7)免疫试剂盒表皮生长因子样重复折叠1结构域蛋白3抗体NUCKS1 核酪蛋白激酶和周期蛋白依赖性激酶底物1抗体
布雷菲尔得菌素A 99%人CXC趋化因子受体4(CXCR4)免疫试剂盒长链脂肪延长酶长ELOVL6抗体NUBP2 核苷结合蛋白2抗体
卡弗他丁C 90%人CXC趋化因子受体3(CXCR3)免疫试剂盒酪氨蛋白激酶受体A6抗体NUBP1 核苷结合蛋白1抗体
毛壳素 98%人CXC趋化因子配体16(CXCL16)免疫试剂盒酪氨蛋白激酶受体A3抗体NUAK2 SNF1/AMP激酶相关激酶2抗体
金黄霉素A 98%人c-sis 免疫试剂盒酪氨蛋白激酶受体A7抗体NTN3/Netrin-3 轴突生长诱导因子3抗体
金黄霉素B 98%人Corin 免疫试剂盒酪氨蛋白激酶受体B1抗体Ntn1 轴突导向因子1抗体
瑞氏-姬姆萨复合染液环核苷酸门控阳离子通道蛋白CNG-1β抗体Human ILDR2(Immunoglobulin-like domain-containing receptor 2) ELISA Kit金丝桃苷 Hyperoside
CD30抗体Human NPY(Neuropeptide Y) ELISA Kit神经氨酸酶(梭)
角蛋白19,17,14,42,10抗体Human HAS3(Hyaluronan Synthase 3) ELISA Kit开环异落叶松树脂酚二葡萄糖苷 Secoisolariciresinol diglucoside 1
角蛋白10抗体Human PRODH(Proline dehydrogenase 1, mitochondrial) ELISA KitGST琼脂糖凝胶4B
电压依赖性钙通道Cav1.1抗体Human DJ-1/PARK 7 ELISA Kit丁基琼脂糖凝胶4B
肌酸磷酸激酶2抗体Human NAC-alpha(Nascent polypeptide-associated complex subunit alpha) ELISA Kit一缩二
烟碱型乙酰胆碱受体α7抗体Human GRIA1(Glutamate receptor 1) ELISA Kit人胃泌素释放肽体(ProGRP)ELISA试剂盒,ProGRP ELISA kit
氯离子通道调节蛋白1A抗体Human PARK2(E3 ubiquitin-protein ligase parkin) ELISA Kit人破骨分化因子(ODF)ELISA试剂盒, ODF ELISA
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