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抗酒石酸酸性磷酸酶染液
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:抗酒石酸酸性磷酸酶染液
英文名称:
产品规格:20T
发货周期:1~3天
检验原理:
在酸性的缓冲液中,细胞内酸性磷酸酶催化底物水解,其生成物进而与一种稳定的重氮盐偶联,生成不溶性的偶氮染料沉淀,当底物中存在酒石酸时,该反应只出现在特异性细胞中。
用途:
抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)染色可以了解破骨细胞的功能状态,并对毛细胞性白血病有助诊断,本染液可用于石蜡切片、血液、骨髓及培养细胞的涂片、爬片、以及冰冻切片的细胞染色。
储存:4℃,有效期6个月。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
芦竹碱 分析标准品,>98%人G1/S特异性周期蛋白E1(CCNE1)免疫试剂盒转录因子ERF抗体Oct-3/Oct-4 胚胎干关键蛋白抗体
芦竹碱 98%人F-肌动蛋白(F-actin)免疫试剂盒化转录因子ERF抗体OCT2 阳离子转运蛋白2抗体
3-吲哚乙 98%人FOS 样抗原2(FOSL2)免疫试剂盒真核肽链释放因子1抗体Oct-2 胚胎干关键蛋白2抗体
3-吲哚乙 分析标准品,>99%人FMS样酪氨激酶3配体(Flt-3L)免疫试剂盒真核肽链释放因子3a抗体OCT1 阳离子转运器1抗体
3-吲哚乙 用于植物培养,98%人FMS样酪氨激酶3(Flt3)免疫试剂盒表皮生长因子受体底物15抗体Oct-1 胚胎干关键蛋白1抗体
3-吲哚 98%人Fc受体样蛋白3(FCRL3)免疫试剂盒内吞作用辅助蛋白EPN1抗体OCLN/Occludin 紧密连接蛋白抗体
3-吲哚 96%人FAM172A蛋白(FAM172A)免疫试剂盒内吞作用辅助蛋白EPN2抗体OCIAD2 卵巢癌免疫反应抗原抗体
吲哚-3- 97%人E选择素(E-Selectin/CD62E)免疫试剂盒内质网定位蛋白ERGI3抗体OCIAD1 卵巢癌免疫反应抗原抗体
3-吲哚乙 96%人E钙粘着蛋白/上皮性钙黏附蛋白(E-Cad)免疫试剂盒内质网氧化物蛋白Ero1-Lα抗体OCEL1 紧密连接蛋白/小分子胶原蛋白OCEL1抗体
吲哚-2-羧 98%人ES1蛋白同系物,线粒体(C21orf33/HES1/KNPI)免疫试剂盒内质网蛋白ERp19抗体OCC1 结肠癌过度表达蛋白1抗体
吲哚-3-羧 98%人Ephrin-B2(EFNB2)免疫试剂盒内质网蛋白ERp72抗体OAT4L/URAT1 尿盐重吸收转运子1抗体
3-吲哚丁 98%人EJ抗体/抗甘氨酰tRNA合成酶抗体(EJ/GlyRS)免疫试剂盒杆菌分泌性蛋白ESAT6抗体OAT-3 阴离子转运蛋白-3抗体
激动素 植物培养, ≥99.0% (HPLC)人Egl九同源物1(EGLN1/C1orf12/PNAS-118/PNAS-137)免疫试剂盒真核翻译起始因子1抗体OAT-1/SLC22A6 阴离子转运蛋白-1抗体
激动素 99%人EB病早期抗原(EBEA)抗体(IgG)免疫试剂盒上皮粘连调控蛋白ESRP2抗体OAT-1/SLC22A6 阴离子转运蛋白-1抗体
1-萘乙 96%人EB病衣壳抗原(EBVCA)抗体(IgM)免疫试剂盒T和嗜性粒表达特应性皮炎蛋白ETEA抗体OAS1 寡腺苷合成酶-1
抗酒石酸酸性磷酸酶染液CD20抗体Human HEV-IgM(hepatitis E virus-Immunoglobulin M) ELISA Kit硼酸铅
12号染色体开放阅读框40抗体Human SCRG1(Scrapie responsive protein 1) ELISA Kit偶氮胂Ⅰ
12号染色体开放阅读框42抗体Human alpha 1 microglobulin ELISA Kit人糖皮质受体β(GR-β)ELISA试剂盒,GR-β ELISA
11号染色体开放阅读框46抗体Human LAMTOR1(Ragulator complex protein LAMTOR1) ELISA Kit人唾液酸(SA)ELISA试剂盒,
11号染色体开放阅读框67抗体Human EZH2(Enhancer of zeste homolog 2) ELISA Kit人钙粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)ELISA试剂盒,
11号染色体开放阅读框77抗体Human HBcAb(hepatitis B virus Core antibody) ELISA Kit人不对称二甲基精氨酸(ADMA)ELISA试剂盒,
11号染色体开放阅读框16抗体Human PHF6(PHD finger protein 6) ELISA Kit人血浆抗凝蛋白S(PS) ELISA试剂盒,
11号染色体开放阅读框21抗体Human HAV-IgM(hepatitis A virus-Immunoglobulin M) ELISA Kit小鼠单核趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA试剂盒,
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