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吉姆萨染色液
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详细内容
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中文名称:吉姆萨染色液
英文名称:Giemsa Stain Solution
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
本品以进口的吉姆萨色素、甲醇为主要原料,含特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰的细胞染色效果。经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。吉姆萨染色液由吉姆萨贮存液(10×)和磷酸盐缓冲液组成,10×贮存液可以单独使用,也可以1:9混合成工作液后使用。
吉姆萨色素是由天青Ⅱ与伊红混合而成。吉姆萨染色原理和结果与瑞氏染色基本相同,吉姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对细胞核着色偏深,核结构显色不佳,故吉姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。
一、一步法涂片染色
1、吉姆萨工作液的配制:
按吉姆萨贮存液(10×):磷酸盐缓冲液=1:9混合,即取1份吉姆萨储存液(10×)加入到9份的磷酸盐缓冲液中充分混匀,即为吉姆萨工作液,该工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。
2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定1-3分钟。
3、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加吉姆萨工作液覆盖涂片,室温滴染。
4、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。
5、干燥、镜检。
6、染色结果:
嗜酸性颗粒————粉红色;
嗜碱性颗粒————紫蓝色;
中性颗粒—————淡紫色
二、两步法涂片染色
1、吉姆萨工作液的配制:
按吉姆萨贮存液(10×):蒸馏水=1:4混合,即取1份的吉姆萨贮存液(10×)加入到4份的蒸馏水中充分混匀,即为吉姆萨工作液。吉姆萨工作液为即用型试剂,不易保存,即用即配。
2、常规方法制备血液涂片或骨髓涂片,待涂片自然干燥后,用甲醇固定。
3、将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上,滴加适量吉姆萨工作液覆盖涂片,室温滴染。
4、加入等量磷酸盐缓冲液,轻轻晃动载玻片,室温静置。
5、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
黄芪皂苷 II 分析标准品,≥98%人SPARC相关模块化钙结合蛋白2(SMOC2)免疫试剂盒质分裂付出蛋白1抗体p70 S6 kinase beta 核糖体蛋白S6激酶1抗体
黄芪总皂苷 分析标准品,≥98%人SPARC相关模块化钙结合蛋白1(SMOC1)免疫试剂盒脑表皮生长因子跨膜蛋白DNER抗体p70 S6 kinase alpha 化核糖体p70 S6蛋白激酶抗体
黄芪皂苷I 分析标准品,≥98%人SMAD3 免疫试剂盒DUX3蛋白抗体P63 protein/P51A P63 肿瘤抑制因抗体
盐黄连碱 分析标准品,≥98%人SMAD2 免疫试剂盒死亡相关蛋白1抗体p58ipk p58ipk抗体
野百合碱 分析标准品人SHC转化蛋白1(SHC1)免疫试剂盒轴丝动力蛋白重链9抗体p55/DCAF1 染色质组装因子1P55抗体
野百合碱 95%人SH2携带蛋白(SHC/SLP⁻⁷6)免疫试剂盒化动力相关蛋白1抗体p53R2/RRM2B 核苷还原酶M2B抗体
千金藤素 分析标准品,≥98%(HPLC)人Seryl- tRNA合成酶,质(SARS/SERS)免疫试剂盒DNA连接酶4抗体p53BP1/53BP1 p53结合蛋白1抗体
白屈菜红碱 分析标准品,>98% 人Salusin Beta(Salusin β)免疫试剂盒二肽肽酶6抗体p53AIP1 p53调节凋亡诱导蛋白1抗体
班蝥素 分析标准品,≥98%人Salusin Alpha(Salusin α)免疫试剂盒二氢叶还原酶抗体P53(wt-p53) (D2F7) 肿瘤抑制因野生型P53单抗
莪术 分析标准品,≥98%人SAA/LDL复合物 免疫试剂盒有丝分裂控制样蛋白DIS3L抗体P53(wt-p53) 肿瘤抑制因抗体(野生型P53)
五加皂苷B 分析标准品,≥98%人S100钙结合蛋白P(S100P)免疫试剂盒有丝分裂控制蛋白样DIS3L2抗体P53 protein(wt-p53) 肿瘤抑制因P53蛋白抗体(野生型P53)
告达亭甙元 分析标准品,≥98%人S100钙结合蛋白A9/钙粒蛋白B(S100A9)免疫试剂盒DOM3Z蛋白抗体p53 DINP1 p53诱导核蛋白1抗体
断血流皂苷A 分析标准品,≥98%人S100钙结合蛋白A8/钙粒蛋白A(S100A8)免疫试剂盒蓬乱蛋白2抗体p53 (FL-393) 肿瘤抑制因p53抗体
鼠尾草 分析标准品,≥92%人S100钙结合蛋白A8/A9复合物(S100A8/A9)免疫试剂盒化蓬乱蛋白2抗体p53 (DO-1) 肿瘤抑制因p53抗体
黄杨碱 分析标准品,≥99%人S100钙结合蛋白A6/钙粒蛋白A(S100A6)免疫试剂盒转录下调蛋白1抗体P4HB 蛋白二硫键异构酶P4HB抗体
吉姆萨染色液卷曲螺旋结构域蛋白116抗体Human Cleaved CASP8(Cleaved Caspase-8) ELISA KitH33342荧光染料
卷曲螺旋结构域蛋白117抗体Human Rbx2(RNF7) ELISA Kit人P糖蛋白/渗透性糖蛋白(P-gp)ELISA试剂盒,P-gp ELISA kit
卷曲螺旋结构域蛋白127抗体Human FBLN3(Fibulin-3) ELISA Kit人红生成素(EPO)ELISA试剂盒, EPO ELISA
卷曲螺旋结构域蛋白138抗体Human Anti-tissue transglutaminase IgG(Anti-tissue transglutaminase IgG) ELISA Kit小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒,
卷曲螺旋结构域蛋白144NL抗体Human Ig(Immunoglobulin) ELISA Kit人血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA试剂盒,
转录同源蛋白质CUX2抗体Human Cleaved BID/TBID(Cleaved BH3-interacting domain death agonist) ELISA Kit人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒,
卷曲螺旋结构域蛋白146抗体Human GABPA(GA-binding protein alpha chain) ELISA Kit小鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒,
卷曲螺旋结构域蛋白147抗体Human GABP1(GA-binding protein subunit beta-1) ELISA Kit大鼠抗心肌抗体(AMA)ELISA试剂盒,
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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