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中性红染色液(活细胞染色用)
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详细内容
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中文名称:中性红染色液(活细胞染色用)
英文名称:Neutral Red Staining Solution(Living cell staining)
产品规格:100ml
发货周期:1~3天
本染色液是一种组织或细胞染色时常用的可以把细胞核染成红色的染色液。本染色液配制在pH值较接近中性的,并且和普通的细胞培养液等渗的溶液中,可以用于外周血细胞的活体染色,也可以用于其它活体细胞或组织的染色。本染色液经过滤除菌,可以直接用于培养细胞的染色。中性红同时也是一种pH指示剂,在酸性时呈红色,在pH6.8-8.0时呈黄色。细胞核中的核酸呈酸性,因此细胞核会被染成红色。由于溶酶体(lysome)中也是酸性环境,因此溶酶体也是可以被酸性红染色液染成红色的。如果每样需使用0.5ml本染色液,一个包装的本染色液可检测200个样品。如用于涂片的染色,至少可染色500个样品。
CAS:553-24-2
分子式:C15H17IN4
分子量:288.8
注意事项:一次使用本试剂盒时建议先取1-2个样品做预实验。
储存条件:4℃避光,有效期一年。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
3,5-二肼盐盐 95%人α肌动蛋白(α Actin)免疫试剂盒动力蛋白激活蛋白亚3抗体PARL 骨骼肌线粒体膜蛋白PARL抗体
2,6-二肼盐盐 98%人α-黑色素激素(α-MSH)免疫试剂盒动力蛋白激活蛋白6抗体Parkin protein/PARK2 帕金蛋白抗体
2,6-二氟吡啶-3- 95%人α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)免疫试剂盒脱酶2抗体PARG1/Rho GTPase activating protein 29 Rho GTP酶激活蛋白29抗体
3,4-二肼盐盐 97%人α干扰素(IFN-α)免疫试剂盒化DNA依赖性蛋白激酶抗体PARD6B 缺陷性分配同源物β抗体
2-氟肼盐盐 97%人α-辅肌动蛋白4(ACTN-4)免疫试剂盒防御素α4抗体PAR6 缺陷性分配同源物α抗体
3-氟肼盐盐 97%人α-辅肌动蛋白3(ACTN-3)免疫试剂盒DNA损伤结合蛋白1抗体PAR4 蛋白酶激活受体4抗体
6-氟吡啶-3- 96%人α-辅肌动蛋白1(ACTN-1)免疫试剂盒DNA损伤结合蛋白2抗体PAR4 蛋白酶活化受体4抗体
2-氟吡啶-3- 97%人α-防御素4(NP-4)免疫试剂盒CD299抗体PAR3 非典型蛋白激酶C特定相互作用蛋白抗体
2-羟-5-氟吡啶 97%人α淀粉酶(AMY1)免疫试剂盒C型凝集素结构域家族4成员A抗体PAR3 蛋白酶激活受体3抗体
2-氟-5-羟吡啶 95%人α半糖(α-Gal)免疫试剂盒C型凝集素结构域家族6成员A抗体PAR-2 蛋白酶激活受体-2抗体
3-氟-5-羟吡啶 97%人α半糖苷酶(αGAL)免疫试剂盒B淋巴衔接分子DAPP1抗体PAR-1/Thrombin receptor 蛋白酶激活受体-1抗体
3-氟-2-羟吡啶 97%人αN已酰氨葡糖苷酶(αNAG)免疫试剂盒DNA酶1样蛋白1抗体PAP-α/β/γ 多聚合酶α/β/γ抗体
2-氟-3-(三氟) 98%人αL岩藻糖苷酶(AFU)免疫试剂盒抗菌蛋白DCD抗体PAPSS2 腺苷硫激酶2抗体
2-氟-3-羟吡啶 97%人αL艾杜糖苷酶(IDUA)免疫试剂盒肌动蛋白解聚因子抗体PAPSS1 腺苷硫激酶1抗体
4-氟肼盐盐 97%人α2抗纤溶酶(α2-AP)免疫试剂盒甘油二酯酰转移酶2抗体PAPPA 相关血浆蛋白A抗体
中性红染色液(活细胞染色用)卷曲螺旋结构域蛋白102B抗体Human SBDP 120(Alpha II SPECTRIN BREAKDOWN PRODUCT 120) ELISA Kit人蛋白C(Protein C)ELISA试剂盒,
卷曲螺旋结构域蛋白16抗体Human SBDP 150(Alpha II SPECTRIN BREAKDOWN PRODUCT) ELISA Kit小鼠FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒,
色素B还原酶1抗体Human α-GST(α-glutathione S-transferases) ELISA Kit小鼠超氧化物歧化酶(SOD)ELISA试剂盒,
2号染色体开放阅读框76抗体Human SBDP 145(Alpha II SPECTRIN BREAKDOWN PRODUCT) ELISA Kit大鼠乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒,
3号染色体开放阅读框19抗体Human PI3K(Phosphotylinosital 3 Kinase) ELISA Kit大鼠热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒,
色素c氧化酶5A抗体Human FBXO32(F-box only protein 32) ELISA Kit豚鼠白介素4(IL-4)ELISA试剂盒,
卷曲螺旋结构域蛋白60抗体Human PIF/DCD(Proteolysis Inducing Factor/Dermcidin) ELISA Kit猴透明质酸(HA)ELISA试剂盒,
卷曲螺旋结构域蛋白144A抗体Human PGE2(Prostaglandin E2) ELISA Kit兔子脑钠素/脑钠尿肽(BNP)ELISA试剂盒,
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
热门标签:中性红,染色液,活细胞染色用













