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改良型天狼猩红染色试剂盒
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详细内容
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
中文名称:改良型天狼猩红染色试剂盒
英文名称:Enhanced Sirius Red Straining Kit
产品规格:100mL
发货周期:1~3天
天狼猩红是一种很强的酸性染料,易与胶原纤维中的碱性基团反应,使胶原纤维产生明显的双折光现象,在偏振光显微镜下显示特异性地呈现红色。本产品就是在此原理的基础上改良后开发的产品。
产品特点:
即开即用,用户不需要单独配制各种溶液。
染色过程只需几分钟,比传统的-天狼猩红染色方法更加快捷。
增强型,染色结果更加清晰,能根据颜色不同区分Ⅰ型和Ⅲ型胶原。而MASSON染色法却不能显示胶原类型。
可用于在普通显微镜下可以观察胶原纤维的分布,也可用于在偏振光显微镜下区分I型和III型胶原。
储存条件:常温运输和保存,有效期两年。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
聚乙二壬 90% active ingredients basis人雌二(E2)免疫试剂盒DHH蛋白抗体phospho-Alpha synuclein(Tyr133) 化核突触蛋白α抗体
聚乙二壬 90% active ingredients basis人垂体腺苷环化酶激活肽(PACAP)免疫试剂盒D型多巴色素脱羧酶phospho-Alpha synuclein(Ser129) 化核突触蛋白α抗体
对羟 AR,99.0%人垂草扁桃(VMA)免疫试剂盒DNA聚合酶α抗体phospho-Alpha synuclein (Tyr136) 化核突触蛋白α抗体
二乙二二丁 99%人穿孔素/成孔蛋白(PRF1/PFP)免疫试剂盒MREG蛋白抗体phospho-Alpha synuclein (Tyr125) 化核突触蛋白α抗体
烯糠酯 95%人程序性死亡因子4(PDCD4)免疫试剂盒RAS相关抑生长蛋白1抗体phospho-alpha Adducin(Ser726) 化内收蛋白a1抗体
缩水甘油糠 96%人程序性死亡因子配体1(PD-L1/CD274)免疫试剂盒MAP激酶激活死亡域蛋白2C抗体phospho-ALK/CD246(Tyr1604) 化间变型淋巴瘤激酶抗体
烯异酯 85-90%,含150-200 ppm MEHQ稳定剂人程序性死亡-1(PD-1)免疫试剂盒状腺素5'脱酶3抗体phospho-ALK/CD246(Tyr1586) 化间变型淋巴瘤激酶抗体
二烯新戊二酯 90%人成纤维生长因子9(FGF9)免疫试剂盒D型阿片受体抗体phospho-ALK/CD246(Tyr1278/1282/1283) 化间变型淋巴瘤激酶抗体
三羟烷烯酯 80%人成纤维生长因子8(FGF8)免疫试剂盒畸形表皮自调节因子1抗体phospho-AKT3 (Ser472) 化蛋白激酶AKT3抗体
环烷羧 98%人成纤维生长因子6(FGF6)免疫试剂盒脑发育同源蛋白2抗体phospho-AKT2 (Ser474) 化蛋白激酶B2抗体
2,4-二羟 98%人成纤维生长因子4(FGF4)免疫试剂盒周期素D相互作用蛋白1抗体phospho-AKT1/AKT2(Thr308+Thr309) 化蛋白激酶B抗体
2,4-二羟 ≥97%,Kosher人成纤维生长因子23(FGF-23)免疫试剂盒发育相关蛋白DDX3Y抗体phospho-AKT1/2/3 (Tyr315/316/312) 化蛋白激酶AKT1,2,3抗体
N-异 99%人成纤维生长因子21(FGF21/UNQ3115/PRO10196)免疫试剂盒核仁蛋白NAP57抗体phospho-AKT1(Thr34) 化蛋白激酶B抗体
N-异 分析标准品人成纤维生长因子13(FGF-13)免疫试剂盒DLST蛋白抗体phospho-AKT1(Ser129) 化蛋白激酶B抗体
间二 98%人成纤维生长因子10(FGF10)免疫试剂盒桥粒斑蛋白1+2抗体phospho-AKT/PKB(Ser473) 化蛋白激酶B抗体
改良型天狼猩红染色试剂盒卷曲螺旋结构域蛋白11抗体Human DEFB105(Beta-defensin 105) ELISA Kit人冷球蛋白(CG)ELISA试剂盒,
中心体蛋白55kDa抗体Human CORT(Corticosterone) ELISA Kit小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA试剂盒,
富含半胱氨酸与表皮生长因子样蛋白2抗体Human PGRN(Progranulin) ELISA Kit小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒,
骨架相关蛋白2/肿瘤和微管相关蛋白抗体Human OxHDL(Oxidized high-density lipoprotein) ELISA Kit大鼠维生素A(VA)ELISA试剂盒,
染色质修饰蛋白4B(4C)抗体Human TUBA1B(Tubulin alpha-1B chain) ELISA Kit兔血管内皮粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA试剂盒,
磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体Human CORT(Corticosterone) ELISA Kit兔环磷酸腺苷(cAMP)ELISA试剂盒,
磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体Human PGRN(Progranulin) ELISA Kit兔子纤溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA试剂盒,
磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体Human CAGE1(Cancer associated gene 1 protein) ELISA Kit豌豆凝集素(PSA)ELISA试剂盒,
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
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