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苏木素染色液(Gill法)
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详细内容
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
中文名称:苏木素染色液(Gill法)
英文名称:Hematoxylin Staining Solution
产品规格:15mL
发货周期:1~3天
苏(HE)是从热带豆科植物苏木的干枝中提取的一种色素,是组织化学和免疫组织化学中常用的染料之一。苏不能直接染色,必须暴露在空气中变成氧化苏(又叫苏木素)-成熟后才能使用。苏的成熟过程需时较长,配制后时间愈久,染色力愈强。采用苏木素染色液进行免疫染色后的复染,操作步骤简便,操作时间短。可以广泛用于组织切片或培养细胞的染色,或与免疫组织化学、免疫细胞化学、免疫荧光、原位杂交等配合使用。使用苏木素染色试剂盒,染色后可以进行免疫染色或其它染料的复染。苏木素染色后的细胞核呈现蓝色,细胞浆呈现粉红色或红色。
储存条件:常温保存,有效期至少一年。
公司产品仅用于科研现货供应,质量有保证、价格优惠、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片完全浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
注意事项
1. 微量试剂取用请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施,穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞,流式细胞仪检测时,细胞数量不以应低于1×105,,不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞,建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当,可能引起假阳性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团,而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中,防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭,请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同,因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照,进行荧光补偿的调节。
2,4-二溴 98%人脆性组氨三联体(FHIT)免疫试剂盒DENND1B蛋白抗体phospho-Arhgef2(Ser810) 化Rho鸟苷交换因子2抗体
苄化铵 98%人催素诱导蛋白(PIP)免疫试剂盒DEPTOR蛋白抗体phospho-arfaptin 2(Ser260) 化ADP核糖化因子结合蛋白2抗体
戊二(50%) AR,50% in H2O 人催素抑制激素(PIH)免疫试剂盒耳聋常染色体显性遗传相关蛋白1抗体phospho-AQP2(Ser269) 化水通道蛋白2抗体
戊二(50%) 高纯度医用,50% in H2O人催素释放激素(PRH)免疫试剂盒短链脱氢酶/还原酶家族9抗体phospho-AQP2(Ser264/261) 化水通道蛋白2抗体
戊二(50%) 电镜,50% in H2O人催素(PRL)免疫试剂盒短链脱氢还原酶13抗体phospho-AQP2(Ser264) 化水通道蛋白2抗体
戊二(50%) 照相,50% in H2O人催产素受体(OXTR)免疫试剂盒视网膜短链脱氢酶/还原酶家族7抗体phospho-AQP2(Ser261) 化水通道蛋白2抗体
聚乙二单 均分子量350 人催产素(OT)免疫试剂盒短链脱氢酶/还原酶家族X抗体phospho-APS(Ser598) 化APS抗体
聚乙二单 均分子量750 人促胰液素/胰泌素(Secretin)免疫试剂盒短链脱氢酶/还原酶家族4抗体phospho-APP/ABPP(Tyr757) 化APP(Tyr757)淀粉样肽体蛋白抗体
聚乙二单 平均分子量500人促胰液素/分泌素受体(SR)免疫试剂盒干扰肾癌蛋白2抗体phospho-APP/ABPP(Thr743) 化APP淀粉样肽体蛋白抗体
壬酚聚氧乙烯(NP 40) ~10% in H2O人促性腺激素释放激素(GnRH)免疫试剂盒DGCR2蛋白抗体phospho-APP/ABPP(Thr668) 化APP淀粉样肽体蛋白抗体
硝乙烷 CP人促酰化蛋白(ASP)免疫试剂盒短链脱氢酶/还原酶家族7C抗体phospho-APP/ABPP(Ser198) 化APP淀粉样肽体蛋白抗体
硝乙烷 99%人促胃液素受体(GsaR)免疫试剂盒松果体N乙酰羟色抗体phospho-APP/ABPP (Thr743) 化APP淀粉样肽体蛋白抗体
硝乙烷 99.8%,药用人促睡眠肽(DSIP)免疫试剂盒短链脱氢还原酶1抗体phospho-APP/ABPP (Ser730) 化APP淀粉样肽体蛋白抗体
聚乙二 average Mn 200人促生长激素释放激素(GHRH)免疫试剂盒DNAJC7蛋白抗体phospho-APG4B(Ser309) 化自噬相关蛋白4B抗体
聚乙二 average Mn 1000人促肾上腺皮质激素(ACTH)免疫试剂盒动力结合蛋白DNMBP抗体phospho-APE(Ser1417) 化肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体
苏木素染色液(Gill法)血小板活化因子CTR9抗体Human USP18(Ubiquitin Specific Peptidase18) ELISA Kit人雄烯二酮(ASD)ELISA试剂盒,ASD ELISA
列环素合成酶抗体Human HDAC(Histone deacetylase) ELISA Kit人颗粒酶A(Gzms-A)ELISA试剂盒,
软骨寡聚基质蛋白抗体Human NAG(Neutral alpha-glucosidase) ELISA Kit小鼠抗红抗体(RBC)ELISA试剂盒,
TCD1A抗体Human SSC5D(Soluble scavenger receptor cysteine-rich domain-containing protein SSC5D) ELISA Kit小鼠内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA试剂盒,
磷酸化周期素B1抗体Human DEFB105(Beta-defensin 105) ELISA Kit大鼠Bcl-2相关X蛋白(BAX)ELISA试剂盒,
胞浆型磷脂酶A2抗体Human Foxj1(Forkhead box protein J1) ELISA Kit豚鼠降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA试剂盒,
胆固酯转移蛋白抗体Human IS(serum indoxyl sulfate) ELISA Kit兔儿茶酚(CA)ELISA试剂盒,Rabbit catecholamine,CA ELISA试剂盒
紧密连接蛋白6抗体Human HOXB7(Homeobox protein Hox-B7) ELISA KitXLT4琼脂
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