测定意义:土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化,其水解产物是高等植物的氮源之。S-ACPT 在酸性环境下催化蛋白质水解,与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。测定原理:酸性条件下,S-ACPT 可将酪蛋白水解产生酪氨酸;在碱性条件下,酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝;在680nm 有特征吸收峰。所需仪器及设备:可见分光光度计、水浴锅、磁力搅拌器、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、蒸馏水。
样本处理
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30~50 目筛。
实验实例: 1、 分别取 2 份 0.1g 土样于 1.5mLEP 管中,分别为对照管及测定管。按照测定步骤操作,测得计算ΔA 测定=A 测 定管-A 对照管=0.206-0.178=0.028,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.540-0.028=0.512,按土壤重量计算酶活得: 土壤酸性蛋白酶(U/g 土样)= 0.1×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W= 0.1×0.028÷0.512÷0.1= 0.0547U/g 土样。 2、 分别取 2 份 0.1g 三叶草土样于 1.5mLEP 管中,分别为对照管及测定管。按照测定步骤操作,测得计算ΔA 测 定=A 测定管-A 对照管=0.831-0.612=0.219,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.540-0.028=0.512,按土壤重量计算 酶活得: 土壤酸性蛋白酶(U/g 土样)= 0.1×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W= 0.1×0.219÷0.512÷0.1=0.0313 U/g 土样。