测定意义：LDH（EC 1.1.1.27）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径的末端酶，催化丙酮酸与乳酸之间的可逆反应，伴随着NAD+/NADH之间互变。
测定原理：LDH催化NAD+氧化乳酸生成丙酮酸，丙酮酸进步与2, 4 - 二硝基苯肼作用生成丙酮酸二硝基苯腙，在碱性溶液中显棕红色，颜色深浅与丙酮酸浓度成正比。
试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、恒温水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。


LDH活力单位计算
1. 标准曲线的绘制：根据标准管测定值和浓度做标准曲线，y 为标准品浓度，μmol/mL；x 为对吸光度（减去浓 度为 0 的标准管的 OD 值）。


2. 计算样本丙酮酸的含量，即将ΔA 带入回归方程中（x），计算 y 值（μmol/mL）。


3. 血清（浆）LDH 活力的计算 单位的定义：每 mL 血清（浆）每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为个酶活力单位。 LDH（U/mL）=y×V 样÷V 样÷T×10 3=66.7×y


4. 细胞、细菌和组织中 LDH 活力的计算 （1）按样本蛋白浓度计算： 单位的定义：每 mg 组织蛋白每分钟催化产生 1 nmol 丙酮酸定义为个酶活力单位。 LDH（U/mg prot）= y×V 样÷（Cpr×V 样）÷T×10 3=66.7×y÷Cpr （2）按样本质量计算： 单位的定义：每 g 组织每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为个酶活力单位。 LDH（U/g 质量）= y×V 样÷（W÷V 样总×V 样）÷T×10 3=66.67×y÷W （3）按细菌或细胞密度计算： 单位的定义：每 1 万个细菌或细胞每分钟催化产生 1nmol 丙酮酸定义为个酶活力单位。 LDH（U/10 4 cell）= y×V 样÷（500÷V 样总×V 样）÷T×10 3=0.133×y V 样：反应体系中加入的样本体积，50μL=0.05mL；V 样总：加入的提取液体积，1mL；T：反应时间，15min； Cpr：蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万；10 3：单位换算系数，1μmol/mL=10 3nmol/mL。