测定原理：PPO能够催化邻苯二酚产生醌，后者在410nm有特征光吸收。

需要的仪器，耗材:可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

产品简介： PPO 主要存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是种含铜的氧化酶，能使元酚和二元酚氧化产生醌， 从而引起褐化，与果蔬加工、茶叶品质和组培等密切相关。 PPO 能够催化邻苯二酚产生醌，后者在 410nm 有特征光吸收。

注意：实验之建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者 增加样本量进行检测。


PPO 活性计算 （1）按样本蛋白浓度计算： 单位的定义：每分钟每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中使 410nm 处吸光值变化 0.01 定义为个酶活力单位。 PPO（U/mg prot）= ΔA÷0.01×V 反总÷（Cpr×V 样）÷T =60×ΔA÷Cpr （2）按样本质量计算： 单位的定义：每分钟每 g 组织在每 mL 反应体系中使 410nm 处吸光值变化 0.01 定义为个酶活力单位。 PPO（U/g 质量）=ΔA÷0.01×V 反总÷（W÷V 样总×V 样）÷T =60×ΔA÷W （3）按细菌或细胞数量计算： 单位的定义：每分钟每 1 万个细菌或细胞在每 mL 反应体系中使 410nm 处吸光值变化 0.01 定义为个酶活力 单位。 PPO（U/10 4 cell）= ΔA÷0.01×V 反总÷（500÷V 样总×V 样）÷T =0.12×ΔA V 反总：反应体系总体积，0.9mL；V 样：加入反应体系中样本体积，0.15mL；V 样总：加入提取液体积，1mL； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细菌或细胞数量，500 万；T：反应时间，10min。