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X-Gal 溶液，20mg/mL10mL
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价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
吴*
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相关标签：克隆及表达
详细内容
X-Gal 溶液，20mg/mL10mL运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需X-Gal 溶液，20mg/mL10mL根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解X-Gal 溶液，20mg/mL10mL性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
大鼠蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)elisa试剂盒，英文名：PKIβ ELISA Kit
大鼠蛋白激酶N2(PKN2)ELISA试剂盒，英文名：PKN2 ELISA Kit
大鼠蛋白激酶D1(PRKD1)ELISA试剂盒，英文名：PRKD1 ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cθ(PKCθ)ELISA试剂盒，英文名：PKCθ ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cη(PKCη)ELISA试剂盒，英文名：PKCη ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cζ(PKCζ)ELISA试剂盒，英文名：PKCζ ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cε(PKCε)ELISA试剂盒，英文名：PKCε ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cγ(PKCγ)ELISA试剂盒，英文名：PKCγ ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cβ1(PKCβ1)ELISA试剂盒，英文名：PKCβ1 ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cα相互作用蛋白1(PICK1)ELISA试剂盒，英文名：PICK1 ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Cα(PKCα)ELISA试剂盒，英文名：PKCα ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Bγ(PKBγ)ELISA试剂盒，英文名：PKBγ ELISA Kit
大鼠蛋白激酶Bβ(PKBβ)ELISA试剂盒，英文名：PKBβ ELISA Kit
大鼠蛋白Z依赖性蛋白酶抑制因子(ZPI)ELISA试剂盒，英文名：ZPI ELISA Kit
大鼠蛋白C(PROC)ELISA试剂盒，英文名：PROC ELISA Kit
大鼠蛋氨酸腺苷转移酶Ⅰα(MAT1α)ELISA试剂盒，英文名：MAT1α ELISA Kit
大鼠弹性蛋白酶3B(ELA3B)ELISA试剂盒，英文名：ELA3B ELISA Kit
大鼠弹性蛋白酶(ELA)ELISA试剂盒，英文名：ELA ELISA Kit
大鼠胆囊收缩素八肽(CCK8)ELISA试剂盒，英文名：CCK8 ELISA Kit
大鼠胆囊收缩素A受体(CCKAR)ELISA试剂盒，英文名：CCKAR ELISA Kit
大鼠胆绿素还原酶A(BLVRA)ELISA试剂盒，英文名：BLVRA ELISA Kit
大鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP3)ELISA试剂盒，英文名：MCP3 ELISA Kit
大鼠单核细胞趋化蛋白1(MCP1)ELISA试剂盒，英文名：MCP1 ELISA Kit
大鼠大麻素受体2(CNR2)ELISA试剂盒，英文名：CNR2 ELISA Kit
大鼠大麻素受体1(CNR1)ELISA试剂盒，英文名：CNR1 ELISA Kit
X-Gal 溶液，20mg/mL10mL大鼠催乳素诱导蛋白(PIP)ELISA试剂盒，英文名：PIP ELISA Kit
大鼠催产素受体(OXTR)ELISA试剂盒，英文名：OXTR ELISA Kit
大鼠簇集蛋白(CLU)ELISA试剂盒，英文名：CLU ELISA Kit
大鼠促微管蛋白聚合蛋白(TPPP)ELISA试剂盒，英文名：TPPP ELISA Kit
大鼠促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒，英文名：GHRH ELISA Kit
大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体2(CRHR2)ELISA试剂盒，英文名：CRHR2 ELISA Kit
大鼠促肾上腺皮质素释放激素受体1(CRHR1)ELISA试剂盒，英文名：CRHR1 ELISA Kit
大鼠促肾上腺皮质素释放激素结合蛋白(CRHBP)ELISA试剂盒，英文名：CRHBP ELISA Kit
大鼠促肾上腺皮质激素受体(ACTHR)ELISA试剂盒，英文名：ACTHR ELISA Kit
大鼠促泌素(SCGN)ELISA试剂盒，英文名：SCGN ELISA Kit
大鼠雌激素受体β(ERβ)ELISA试剂盒，英文名：ERβ ELISA Kit
大鼠雌激素受体α(ERα)ELISA试剂盒，英文名：ERα ELISA Kit
大鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒，英文名：ADCYAP1 ELISA Kit
大鼠穿孔素1(PRF1)ELISA试剂盒，英文名：PRF1 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)ELISA试剂盒，英文名：FGFR1 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子7(FGF7)ELISA试剂盒，英文名：FGF7 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子6(FGF6)ELISA试剂盒，英文名：FGF6 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子4(FGF4)ELISA试剂盒，英文名：FGF4 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子3(FGF3)ELISA试剂盒，英文名：FGF3 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子23(FGF23)ELISA试剂盒，英文名：FGF23 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子21(FGF21)ELISA试剂盒，英文名：FGF21 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子19(FGF19)ELISA试剂盒，英文名：FGF19 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子18(FGF18)ELISA试剂盒，英文名：FGF18 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子15(FGF15)ELISA试剂盒，英文名：FGF15 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子13(FGF13)ELISA试剂盒，英文名：FGF13 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子12(FGF12)ELISA试剂盒，英文名：FGF12 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞生长因子11(FGF11)ELISA试剂盒，英文名：FGF11 ELISA Kit
大鼠成纤维细胞激活蛋白α(FAPα)ELISA试剂盒，英文名：FAPα ELISA Kit
大鼠成纤维生长因子受体底物2(FRS2)ELISA试剂盒，英文名：FRS2 ELISA Kit
大鼠成肌分化蛋白(MyoD)ELISA试剂盒，英文名：MyoD ELISA Kit
大鼠沉默调节蛋白3(SIRT3)ELISA试剂盒，英文名：SIRT3 ELISA Kit
大鼠沉默调节蛋白1(SIRT1)ELISA试剂盒，英文名：SIRT1 ELISA Kit
克隆及表达
