联系我们
联系人：吴菲
产品展示
GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL
点击次数：219
价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
吴*
联系我时，请说明是阿仪网看到的，谢谢!
- 电话: 02*******773
- 手机: 18******584
- 微信:
- 交换名片后展示联系方式 → →
相关标签：克隆及表达
详细内容
GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
小鼠单核细胞趋化蛋白5(MCP-5)ELISA KitMouse Monocyte Chemotactic Protein 5,MCP-5 ELISA Kit
小鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA KitMouse monocyte chemotactic protein 4,MCP-4 ELISA kit
小鼠单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA KitMouse monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISA kit
小鼠单核细胞趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)ELISA KitMouse monocyte chemotactic protein 2,MCP-2 ELISA kit
小鼠大动脉平滑肌肌动蛋白α2(Acta2/Actsa/Actvs)ELISA KitMouse Actin alpha 2,aortic smooth muscle,Acta2/Actsa/Actvs ELISA kit
小鼠催乳素抑制激素(PIH)ELISA KitMouse prolactin-inhibiting hormone,PIH ELISA Kit
小鼠催乳素释放激素(PRH)ELISA KitMouse prolactin-releasing hormone,PRH ELISA Kit
小鼠催产素(OT)ELISA KitMouse oxytocin,OT ELISA Kit
小鼠促有丝分裂因子(MF/MPF)ELISA KitMouse maturation promoting factor,MF/MPF ELISA Kit
小鼠促生长激素释放激素(GHRH)ELISA KitMouse growth hormone releasing hormone,GHRH ELISA Kit
小鼠促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)ELISA KitMouse Corticotropin-releasing Factor,CRF ELISA Kit
小鼠雌激素硫酸转移酶(SULT1E1)ELISA KitMouse Sulfotransferase Family 1E Member 1,SULT1E1 ELISA Kit
小鼠垂草扁桃酸(VMA)ELISA KitMouse vanillylmandelic acid,VMA ELISA Kit
小鼠穿孔素/成孔蛋白(PF/PFP)ELISA KitMouse Perforin/Pore-forming protein,PF/PFP ELISA Kit
小鼠程序性死亡1(PD-1)ELISA KitMouse Programmed Death 1,PD-1 ELISA Kit
小鼠成纤维细胞生长因子9(FGF9)ELISA KitMouse fibroblast growth factor 9(glia-activating factor)(FGF9)ELISA kit
小鼠成纤维细胞生长因子8(FGF8)ELISA KitMouse Fibroblast Growth Factor 8,FGF8 ELISA Kit
小鼠成纤维细胞生长因子6(FGF6)ELISA KitMouse fibroblast growth factor 6,FGF6 ELISA kit
小鼠成纤维细胞生长因子4(FGF4)ELISA KitMouse fibroblast growth factor 4,FGF4 ELISA kit
小鼠成纤维细胞生长因子13(FGF-13)ELISA KitMouse fibroblast growth factor-13,FGF-13 ELISA Kit
小鼠成纤维细胞生长因子10(FGF10)ELISA KitMouse fibroblast growth factor 10,FGF10 ELISA Kit
小鼠成神经细胞瘤RAS病毒(v-ras)癌基因同源物ELISA KitMouse GTPase NRas(NRAS)ELISA kit
小鼠肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA KitMouse intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA Kit
小鼠长停滞特异性基因产物6(gas-6)ELISA KitMouse growth arrest-specific gene-6,gas-6 ELISA Kit
小鼠叉头框蛋白03(FoxP3)ELISA KitMouse forkhead box P3,FoxP3 ELISA Kit
小鼠草铵膦乙酰转移酶(PAT)ELISA KitMouse phosphinothricin acetyltransferase,PAT ELISA Kit
GV3101 农杆菌感受态细胞10×100μL小鼠不对称二甲基精氨酸(ADMA)ELISA KitMouse asymmetrical dimethylarginine,ADMA ELISA Kit
小鼠补体因子H(CFH)ELISA KitMouse complement factor H,CFH ELISA Kit
小鼠补体蛋白5(C5)ELISA KitMouse Complement 5,C5 ELISA Kit
小鼠补体1抑制物抗体(C1INH)ELISA KitMouse Complement 1 inhibitor autoantibody,C1INH ELISA Kit
小鼠波形蛋白(VIM)ELISA KitMouse vimentin,VIM ELISA Kit
小鼠丙型肝炎抗体(IgG)ELISA KitMouse Hepatitis C virus antibody IgG ELISA Kit
小鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA KitMouse pyruvate kinase,PK ELISA Kit
小鼠丙二酸单酰辅酶A(malonyl CoA) ELISA Kitse malonyl coenzyme A ELISA kit
小鼠丙氨酸转氨酶/谷丙转氨酶(ALT/GPT)ELISA KitMouse Alanine Aminotransferase,ALT/GPT ELISA Kit
小鼠表皮生长因子受体(EGFR)ELISA KitMouse Epidermal growth factor receptor,EGFR ELISA kit
小鼠苯丙氨酸(LPA)ELISA KitMouse L-phenylalanine,LPA ELISA Kit
小鼠胞外超氧化物歧化酶[Cu-Zn](SOD3)ELISA KitMouse Extracellular superoxide dismutase [Cu-Zn](SOD3) ELISA kit
小鼠胞内氯离子通道蛋白1(CLIC1)ELISA KitMouse Chloride intracellular channel protein 1,CLIC1 ELISA kit
小鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA KitMouse cytosolic phospholipase A2,cPLA2 ELISA Kit
小鼠膀胱肿瘤抗原(BTA)ELISA KitMouse Bladder tumor antigen,BTA ELISA Kit
小鼠半乳糖凝集素-3(Gal-3)ELISA KitMouse Galectin 3,GAL-3 ELISA Kit
小鼠半乳糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA KitMouse galactose-6-sulphate sulphatase,Gal-6S ELISA Kit
小鼠百日咳病毒IgG抗体ELISA KitMouse bordetella pertussis IgG antibody ELISA Kit
小鼠百白破抗体(DPT)ELISA KitMouse DPT antibody ELISA Kit
小鼠白细胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA KitMouse Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule,ALCAM ELISA Kit
小鼠白三烯E4(LTE4)ELISA KitMouse leukotriene E4,LT-E4 ELISA Kit
小鼠白介素35(IL-35)ELISA KitMouse Interleukin 35,IL-35 ELISA Kit
小鼠白介素33(IL-33)ELISA KitMouse Interleukin 33,IL-33 ELISA Kit
小鼠白介素31(IL-31)ELISA KitMouse Interleukin 31,IL-31 ELISA Kit
小鼠白介素2受体β(IL2rb/CD122)ELISA KitMouse Interleukin-2 receptor subunit beta,Il2rb/CD122 ELISA Kit
小鼠KI-67抗原(MKI67)ELISA KitMouse antigen KI-67,MKI67 ELISA kit
克隆及表达
