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X-Gal 干粉0.5g
点击次数：186
价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
吴*
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相关标签：克隆及表达
详细内容
X-Gal 干粉0.5g运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下X-Gal 干粉0.5g振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
大鼠巢蛋白2(NID2)elisa试剂盒，英文名：NID2 ELISA Kit
大鼠超氧化物歧化酶1(SOD1)ELISA试剂盒，英文名：SOD1 ELISA Kit
大鼠肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)ELISA试剂盒，英文名：FABP2 ELISA Kit
大鼠肠碱性磷酸酶(ALPI)ELISA试剂盒，英文名：ALPI ELISA Kit
大鼠叉头框蛋白O1(FOXO1)ELISA试剂盒，英文名：FOXO1 ELISA Kit
大鼠叉头框蛋白M1(FOXM1)ELISA试剂盒，英文名：FOXM1 ELISA Kit
大鼠层粘连蛋白β1(LAMβ1)ELISA试剂盒，英文名：LAMβ1 ELISA Kit
大鼠层粘连蛋白α1(LAMα1)ELISA试剂盒，英文名：LAMα1 ELISA Kit
大鼠补体因子B(CFB)ELISA试剂盒，英文名：CFB ELISA Kit
大鼠补体受体2(CR2)ELISA试剂盒，英文名：CR2 ELISA Kit
大鼠补体成分9(C9)ELISA试剂盒，英文名：C9 ELISA Kit
大鼠补体成分5a(C5a)ELISA试剂盒，英文名：C5a ELISA Kit
大鼠补体成分5(C5)ELISA试剂盒，英文名：C5 ELISA Kit
大鼠补体成分4a(C4a)ELISA试剂盒，英文名：C4a ELISA Kit
大鼠补体成分4(C4)ELISA试剂盒，英文名：C4 ELISA Kit
大鼠补体成分3(C3)ELISA试剂盒，英文名：C3 ELISA Kit
大鼠补体3a(C3a)ELISA试剂盒，英文名：C3a ELISA Kit
大鼠补体1抑制因子(C1INH)ELISA试剂盒，英文名：C1INH ELISA Kit
大鼠玻连蛋白(VTN)ELISA试剂盒，英文名：VTN ELISA Kit
大鼠丙酮酸脱氢酶磷酸酶(PDP)ELISA试剂盒，英文名：PDP ELISA Kit
大鼠丙酮酸脱氢酶激酶同工酶4(PDK4)ELISA试剂盒，英文名：PDK4 ELISA Kit
大鼠丙酮酸脱氢酶α(PDHα)ELISA试剂盒，英文名：PDHα ELISA Kit
大鼠丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒，英文名：PK ELISA Kit
大鼠丙二酰辅酶A脱羧酶(MLYCD)ELISA试剂盒，英文名：MLYCD ELISA Kit
大鼠别孕烯醇酮(AP)ELISA试剂盒，英文名：AP ELISA Kit
大鼠表皮调节素(EREG)ELISA试剂盒，英文名：EREG ELISA Kit
大鼠表皮生长因子受体2(EGFR2)ELISA试剂盒，英文名：EGFR2 ELISA Kit
大鼠表面活性物质关联蛋白J(SPJ)ELISA试剂盒，英文名：SPJ ELISA Kit
X-Gal 干粉0.5g大鼠表面活性物质关联蛋白D(SPD)ELISA试剂盒，英文名：SPD ELISA Kit
大鼠表面活性物质关联蛋白C(SPC)ELISA试剂盒，英文名：SPC ELISA Kit
大鼠表面活性物质关联蛋白B(SPB)ELISA试剂盒，英文名：SPB ELISA Kit
大鼠表面活性物质关联蛋白A(SPA)ELISA试剂盒，英文名：SPA ELISA Kit
大鼠表睾酮(ET)ELISA试剂盒，英文名：ET ELISA Kit
大鼠苯酚磺基转移酶(PST)ELISA试剂盒，英文名：PST ELISA Kit
大鼠胞外超氧化物歧化酶(SOD3)ELISA试剂盒，英文名：SOD3 ELISA Kit
大鼠胞外5＇-核苷酸酶(NT5E)ELISA试剂盒，英文名：NT5E ELISA Kit
大鼠半乳糖凝集素9(GAL9)ELISA试剂盒，英文名：GAL9 ELISA Kit
大鼠半乳糖凝集素7(GAL7)ELISA试剂盒，英文名：GAL7 ELISA Kit
大鼠半乳糖-1-磷酸尿苷酰转移酶(GALT)ELISA试剂盒，英文名：GALT ELISA Kit
大鼠半乳凝素8(GAL8)ELISA试剂盒，英文名：GAL8 ELISA Kit
大鼠半乳凝素4(GAL4)ELISA试剂盒，英文名：GAL4 ELISA Kit
大鼠半乳凝素3(GAL3)ELISA试剂盒，英文名：GAL3 ELISA Kit
大鼠半乳凝素2(GAL2)ELISA试剂盒，英文名：GAL2 ELISA Kit
大鼠半乳凝素1(GAL1)ELISA试剂盒，英文名：GAL1 ELISA Kit
大鼠半胱氨酰白三烯受体2(CYSLTR2)ELISA试剂盒，英文名：CYSLTR2 ELISA Kit
大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制剂3(CST3)ELISA试剂盒，英文名：CST3 ELISA Kit
大鼠白细胞介素24(IL24)ELISA试剂盒，英文名：IL24 ELISA Kit
大鼠白细胞激活黏附因子(ALCAM)ELISA试剂盒，英文名：ALCAM ELISA Kit
大鼠白介素9(IL9)ELISA试剂盒，英文名：IL9 ELISA Kit
大鼠白介素8受体β(IL8Rβ)ELISA试剂盒，英文名：IL8Rβ ELISA Kit
大鼠白介素8受体α(IL8Rα)ELISA试剂盒，英文名：IL8Rα ELISA Kit
大鼠白介素7受体(IL7R)ELISA试剂盒，英文名：IL7R ELISA Kit
克隆及表达
