联系我们
联系人：吴菲
产品展示
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次
点击次数：186
价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
吴*
联系我时，请说明是阿仪网看到的，谢谢!
- 电话: 02*******773
- 手机: 18******584
- 微信:
- 交换名片后展示联系方式 → →
相关标签：克隆及表达
详细内容
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
猪磷酸化乙酰辅酶A羧化酶(pACCase)ELISA KitPig Phosphorylated acetyl-CoA catboxylase,pACCase ELISA Kit
猪磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)ELISA KitPig Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,pAMPK ELISA Kit
猪磷酸甘油酸酯激酶2(PGK2)ELISA KitPig Phosphoglycerate kinase 2,PGK2 ELISA kit
猪蓝耳病毒(PRRSV)抗体(IgG)ELISA KitPig reproductive ａnd respiratory syndrome virus(PRRSV)antibody(IgG)ELISA kit
猪赖氨酰氧化酶(LOX)ELISA KitPig Lysyl Oxidase ELISA Kit
猪口蹄疫抗体(FMDV)ELISA KitPig Foot ａnd Mouth Disease Virus Antibody ELISA Kit
猪口蹄疫抗体(IgM)ELISA KitPig Antibody against Foot ａnd Mouth Disease(FMDV)IgM ELISA kit
猪口蹄疫抗体(IgG)ELISA KitPig Foot ａnd Mouth Disease Virus Antibody IgG ELISA Kit
猪抗中性粒细胞弹性蛋白酶抗体(ANEA)ELISA KitPig anti-neutrophil elastase antibody,ANEA ELISA Kit
猪巨噬细胞迁移抑制因子(糖基化抑制因子)(MIF)ELISA KitPig Macrophage migration inhibitory factor,MIF ELISA kit
猪金属硫蛋白(MT)ELISA KitPig metallothionein,MT ELISA kit
猪结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA KitPig Haptoglobin,Hpt/HP ELISA Kit
猪窖蛋白Caveolin-1(CAV1)ELISA KitPig Caveolin-1,CAV1 ELISA kit
猪降钙素原(PCT)ELISA KitPig Procalcitonin,PCT ELISA Kit
猪降钙素基因相关肽(CGRP)ELISA KitPig calcitonin gene related peptide,CGRP ELISA Kit
猪碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA KitPig basic fibroblast growth factor,bFGF ELISA Kit
猪甲状腺素(T4)ELISA KitPig Thyroxine,T4 ELISA Kit
猪极低密度脂蛋白(VLDL)ELISA KitPig very low density lipoprotein,VLDL ELISA Kit
猪激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA KitPig hormone sensitive lipase,HSL ELISA Kit
猪激动异构酶/细胞分裂素MB(CKMB)ELISA KitPig cytokinin MB,CKMB ELISA Kit
猪基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA KitPig Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISA Kit
猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)ELISA KitPorcine matrix metalloproteinase 9,MMP-9 ELISA Kit
猪基质金属蛋白酶2/明胶酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA KitPig matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit
猪肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA KitPig creatine kinase MB isoenzyme,CK-MB ELISA kit
猪肌酸激酶(CK)ELISA KitPig Creatine Kinase,CK ELISA Kit
猪肌红蛋白(MB)ELISA KitPig Myoglobin,MB ELISA kit
猪肌U型酸激酶,线粒体(CKMT1)ELISA KitPig creatine kinase U-type,mitochondrial(CKMT1)ELISA kit
猪饥饿激素(GHRL)ELISA KitPig Appetite-regulating hormone,GHRL ELISA kit
猪活性氧(ROS)ELISA KitPig Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit
猪活化蛋白C(APC)ELISA KitPig activated protein C,APC ELISA Kit
猪黄体生成素(LH)ELISA KitPig luteinizing hormone,LH ELISA kit
猪环磷酸腺苷(cAMP)ELISA KitPig cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
猪环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA KitPig cyclic guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
猪化学趋化因子(KC)ELISA KitPig keratinocyte chemoattractant,KC ELISA Kit
一站式 TA 克隆试剂盒 ( 含感受态 )20 次猪红细胞生成素(EPO)ELISA KitPig Erythropoietin,EPO ELISA Kit
猪黑素皮质素受体-2(MC2R)ELISA KitPig melanocortin2-receptor,MC2R ELISA kit
猪核因子-κB(NF-κB)ELISA KitPig Nuclear factor-kappa B,NF-κB ELISA Kit
猪含免疫球蛋白样环和上皮生长因子样域酪氨酸激酶2(Tie-2)ELISA KitPig tyrosine kinase with immunoglobulin-like ａnd EGF-like domains 2,Tie-2 ELISA kit
猪胱抑素C(CST3/Cys-C)ELISA KitPig Cystatin-C,CST3 ELISA kit
猪胱硫醚β合酶(CBS)ELISA KitPig cystathionine-beta-synthase,CBS ELISA kit
猪骨形成蛋白2(BMP-2)ELISA KitPig Bone Morphogenetic Protein 2,BMP-2 ELISA Kit
猪骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA KitPig bone-specific alkphase B,ALP-B ELISA Kit
猪骨成型蛋白7(BMP7)ELISA KitPig Bone morphogenetic protein 7,BMP7 ELISA kit
猪谷氨酰铵转氨酶 ELISA KitPig glutamine Aminotransferase ELISA Kit
猪谷氨酰铵合成酶(GS)ELISA KitPig glutamine synthase,GS ELISA Kit
猪高尔基蛋白73(GP⁻⁷3)ELISA KitPig golgi protein 73,GP⁻⁷3 ELISA Kit
克隆及表达
