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裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 ( 含转化液 )20 次
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更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
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吴*
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相关标签：克隆及表达
详细内容
裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 ( 含转化液 )20 次产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 ( 含转化液 )20 次使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。
人 KIAA1199 ELISA KitHuman KIAA1199 ELISA Kit
犬ELISA Kit
犬组织因子(TF)ELISA KitCanine Tissue Factor,TF ELISA Kit
犬组铵(HIS)ELISA KitCanine Histamine,HIS ELISA Kit
犬转移生长因子β1(TGF-β1)ELISA KitDog Transforming growth factor β1,TGF-β1 ELISA Kit
犬肿瘤坏死因子α(TNF-α )ELISA KitDog Tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit
犬脂多糖/内毒素(LPS)ELISA KitCanine Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
犬脂蛋白脂酶(LPL)ELISA KitCanine Lipoprotein Lipase,LPL ELISA Kit
犬孕激素/孕酮(PROG)ELISA KitCanine Progesterone,PROG ELISA kit
犬诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA KitDog inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA Kit
犬游离脂肪酸(FFA)ELISA KitDog free fatty acids,FFA ELISA kit
犬游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA KitCanine Free Tri-iodothyronine Indes,Free-T3 ELISA Kit
犬游离甲状腺素(FT4)ELISA KitCanine Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit
犬抑制素β-B(Inhbb)ELISA KitCanine inhibin beta-B,Inhbb ELISA Kit
犬乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA KitCanine hepatitis B virus surface antigen,HBsAg ELISA Kit
犬乙酰胆碱受体抗体(AChRab)ELISA KitCanine acetylcholine receptor antibody,AChRab ELISA Kit
犬胰腺甘油三酯脂酶(PNLIP)ELISA KitDog Pancreatic triacylglycerol lipase,PNLIP ELISA kit
犬胰高血糖素样肽1(GLP1)ELISA KitDog glucagon like peptide 1,GLP1 ELISA Kit
犬胰岛素原(PI)ELISA KitCanine Proinsulin,PI ELISA Kit
犬胰岛素样因子3(INSL3)ELISA KitDog insulin-like 3,INSL3 ELISA Kit
犬胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)ELISA KitDog insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP3 ELISA kit
犬胰岛素样生长因子II(IGF2)ELISA KitDog Insulin-like growth factor II,IGF2 ELISA kit
犬胰岛素样生长因子1(IGF1)ELISA KitDog insulin-like growth factor 1,IGF1 ELISA kit
犬胰岛素受体β(ISR-β)ELISA KitCanine Insulin Receptor β,ISR-β ELISA KIT
犬胰岛素(INS)ELISA KitDog Insulin,INS ELISA Kit
犬胰蛋白酶原激活肽(TAP)ELISA KitCanine trypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit
犬胰蛋白酶原-1 ELISA KitCanine trypsinogen 1 ELISA Kit
犬胰蛋白酶(trypsin)ELISA KitCanine trypsin ELISA Kit
犬一氧化氮(NO)ELISA KitCanine nitric oxide,NO ELISA Kit
犬叶酸(FA)ELISA KitCanine Folic acid,FA ELISA Kit
犬血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA KitCanine Fibrinogen Degradation Product,FDP ELISA Kit
犬血纤蛋白原(Fbg)ELISA KitDog fibrinogen,Fbg ELISA Kit
犬血栓素B2(TXB2)ELISA KitCanine Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit
犬血栓前体蛋白(TpP)ELISA KitCanine thrombus precursor protein,TpP ELISA Kit
裂殖酵母化学感受态细胞制备试剂盒 ( 含转化液 )20 次犬血栓调节蛋白(TM)ELISA KitDog thrombomodulin,TM ELISA Kit
犬血清淀粉样蛋白A2(SAA2)ELISA KitCanine serum amyloid A2,SAA2 ELISA Kit
犬血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA KitDog serum amyloid A,SAA ELISA Kit
犬血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)ELISA KitDog von Willebrand Factor,vWF ELISA Kit
犬血管紧张素转化酶2(ACE2)ELISA KitDog Angiotensin-converting enzyme 2,ACE2 ELISA kit
犬血管紧张素转化酶(ACE)ELISA KitDog angiotensin I converting enzyme(peptidyl-dipeptidase A)1(ACE)ELISA kit
犬血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA KitDog angiotensin Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
犬血管紧张素1⁻⁷(Ang1⁻⁷)ELISA KitDog angiotension 1⁻⁷,Ang1⁻⁷ ELISA kit
犬胸腺肽α1(Thymosin α1)ELISA KitCanine Thymosin α1 ELISA Kit
犬胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA KitDog TSLP ELISA Kit
犬胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)ELISA KitCanine thymus activation regulated chemokine,TARC/CCL17 ELISA Kit
犬心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)ELISA KitCanine heart fatty acid binding protein,h-FABP ELISA Kit
犬心肌特异性肌钙蛋白T(cTnT)ELISA KitCanine cardiac isoform of Tropnin T,cTnT ELISA Kit
犬心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA KitCanine Cardiac Troponin Ⅰ,cTn-Ⅰ ELISA kit
犬纤溶酶原激活物抑制剂1(SERPINE1)ELISA KitDog plasminogen activator inhibitor 1,SERPINE1 ELISA kit
犬细小病毒(PV)抗体(IgG)ELISA KitDog parvovirus(PV)antibody IgG ELISA kit
犬细胞间粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA KitDog intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1/CD54 ELISA Kit
犬维生素K1(VK1)ELISA KitCanine Vitamin K1,VK1 ELISA Kit
犬维生素E(VE)ELISA KitCanine Vitamin E,VE ELISA Kit
犬维生素A(VA)ELISA KitDog Vitamin A,VA ELISA Kit
克隆及表达
