联系我们
联系人：吴菲
产品展示
lambda(λ)DNA5μg
点击次数：119
价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
吴*
联系我时，请说明是阿仪网看到的，谢谢!
- 电话: 02*******773
- 手机: 18******584
- 微信:
- 交换名片后展示联系方式 → →
相关标签：克隆及表达
详细内容
lambda(λ)DNA5μg运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需lambda(λ)DNA5μg根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
lambda(λ)DNA5μg产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
牛游离纤溶抑制因子/凝血酶激活的纤溶抑制物(TAFI)ELISA KitBovine FreeThrombin activatable fibrinolysis inhibitor,TAFI ELISA Kit
牛印度刺猬因子(IHH)ELISA KitBovine Idian Hedgehog,IHH ELISA kit
牛乙酰辅酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA KitBovine Acetyl-CoA Carboxylase Synthetase,ACC ELISA kit
牛乙酰辅酶A(acetyl-CoA)ELISA KitBovine acetyl-CoA ELISA kit
牛胰高血糖素样肽1(GLP-1)ELISA KitBovine glucagon-like peptide-1,GLP-1 ELISA Kit
牛胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP⁻⁷)ELISA KitBovine insulin-like growth factor binding protein 7,IGFBP⁻⁷ ELISA Kit
牛胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA KitBovine insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA Kit
牛胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP-5)ELISA KitBovine insulin-like growth factor binding protein 5,IGFBP-5 ELISA Kit
牛胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)ELISA KitBovine insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP-4 ELISA Kit
牛胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)ELISA Kitbovine Insulin-like growth factor binding protein 3,IGFBP-3 ELISA kit
牛胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)ELISA KitBovine Insulin-like growth factor binding protein 2,IGFBP-2 ELISA kit
牛胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA KitBovine insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit
牛胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA KitBovine Insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit
牛胰岛素(Insulin)ELISA KitBovine Insulin ELISA kit
牛一氧化氮(NO)ELISA KitBovine Nitric Oxide,NO ELISA Kit
牛叶酸(FA)ELISA KitBovine folic acid,FA ELISA Kit
牛氧杂蒽氧化酶ELISA KitBovine xanthene oxidase ELISA Kit
牛亚硫酸盐氧化酶(sulfite oxidase,SO)ELISA KitBovine Sulfite Oxidase(sulfite oxidase,SO)ELISA Kit
牛血小板生成素(TPO)ELISA KitBovine Thrombopoietin,TPO ELISA kit
牛血小板活化因子乙酰水解酶(PLA2G7)ELISA KitBovine Platelet-activating factor acetylhydrolase,PLA2G7 ELISA kit
牛血小板活化因子(PAF)ELISA KitBovine platelet activating factor,PAF ELISA Kit
牛血小板反应蛋白/凝血酶敏感蛋白1(TSP-1)ELISA KitBovine Thrombospondin 1,TSP-1 ELISA Kit
牛血栓素B2(TXB2)ELISA KitBovine Thromboxane B2,TXB2 ELISA Kit
牛血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA KitBovine Serum amyloid A,SAA ELISA Kit
牛血清白蛋白(BSA)抗体(IgG)ELISA KitBovine serum albumin(BSA)antibody IgG ELISA Kit
牛血清白蛋白(BSA)抗体(IgA)ELISA KitBovine serum albumin(BSA)antibody(IgA)ELISA Kit
牛血清白蛋白(BSA)ELISA KitBovine serum albumin,BSA ELISA kit
牛血清白蛋白(ALB)ELISA KitBovine Serum albumin,ALB ELISA kit
牛血管内皮生长因子受体3(VEGFR-3)ELISA KitBovine Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 3,VEGFR-3 ELISA kit
牛血管内皮生长因子C(VEGFC)ELISA KitBovine vascular endothelial growth factor C,VEGFC ELISA kit
牛雄烯二酮(ASD)ELISA KitBovine Androstenedione,ASD ELISA Kit
牛新包虫抗体ELISA KitBovine Neospora Caninum Antibody ELISA Kit
牛锌金属硫蛋白(Zn-MT)ELISA KitBovine Zn-Metallothionein,Zn-MT ELISA Kit
牛心肌肌钙蛋白T(cTn-T)ELISA KitBovine Cardiac Troponin T,cTn-T ELISA kit
牛心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTn-Ⅰ)ELISA KitBovine cardiac troponin I,cTn-I ELISA kit
牛腺病毒3(ADV3)抗体(IgG)ELISA KitBovine Adenovirus 3(ADV3)antibody IgG ELISA kit
牛纤维蛋白原(Fb)ELISA KitBovine Fibrinogen,Fb Elisa Kit
牛纤连蛋白(FN)ELISA KitBovine Fibronectin,FN ELISA Kit
牛纤调蛋白(FMOD)ELISA KitBovine fibromodulin,FMOD ELISA Kit
lambda(λ)DNA5μg牛细胞色素b-245重链(CYBB)ELISA KitBovine Cytochrome b-245 heavy chain,CYBB ELISA kit
牛细胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)ELISA KitBovine cytokeratin fragment antigen 21-1,CYFRA21-1 ELISA Kit
牛维生素D(VD)ELISA KitBovine Vitamin D,VD ELISA Kit
牛维生素C(VC)ELISA KitBovine vitamin C,VC ELISA Kit
牛维生素B12(VB12)ELISA KitBovine Vitamin B12,VB12 ELISA Kit
牛维生素A(VA)ELISA KitBovine Vitamin A,VA ELISA Kit
牛唾液酸(SA)ELISA KitBovine Sialic Acid,SA ELISA Kit
牛褪黑素(MT)ELISA KitBovine melatonin,MT ELISA Kit
牛铜锌-过氧化物岐化酶(Cu/Zn-SOD)ELISA KitBovine Cu/Zn-Superoxide Dismutase,Cu/Zn-SOD ELISA Kit
牛铜蓝蛋白(CP)ELISA KitBovine Ceruloplasmin,CP ELISA Kit
牛甜菜碱-同型半胱氨酸S-甲基转移酶1(BHMT)ELISA KitBovine Betaine－－homocysteine S-methyltransferase 1,BHMT ELISA kit
牛胎盘生长因子(PGF)ELISA KitBovine Placenta growth factor,PGF ELISA kit
牛羧化不全骨钙素(ucOC)ELISA KitBovine undercarboxylated osteocalcin,ucOC ELISA kit
牛双氢睾酮(DHT)ELISA KitBovine Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit
牛瘦素(LEP)ELISA KitBovine Leptin,LEP ELISA Kit
牛生长抑素(SS)ELISA KitBovine Somatostatin,SS ELISA Kit
牛生长激素释放多肽(GHRP)ELISA KitBovine Growth Hormone Releasing Peptide,GHRP ELISA Kit
牛生长激素(GH)ELISA KitBovine growth hormone,GH ELISA Kit
牛肾上腺髓质素(ADM)ELISA KitBovine adrenomedullin,ADM ELISA kit
牛肾上腺素(EPI)ELISA KitBovine Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit
克隆及表达
