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质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg
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价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
吴*
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相关标签：克隆及表达
详细内容
质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
牛D-乳酸ELISA KitBovine D-lactic acid ELISA Kit
牛C肽(C-Peptide)ELISA KitBovine C-Peptide ELISA Kit
牛C反应蛋白(CRP)ELISA KitBovine C-reactive protein,CRP ELISA Kit
牛5羟色铵/血清素/血清铵(5HT/ST)ELISA KitBovine 5-hydroxytryptamine/serotonin,5HT/ST ELISA kit
牛Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)ELISA KitBovine N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA kit
牛1-磷脂酰肌醇-4,5-二磷酸磷酸二酯酶ζ1(PLCZ1)ELISA KitBovine 1-phosphatidylinositol-4,5-bisphosphate phosphodiesterase zeta-1(PLCZ1)ELISA kit
质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg牛17羟孕酮(17-OHP)ELISA KitBovine 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit
牛1,25二羟基维生素D3(1,25 DHVD3)ELISA KitBovine 1,25-Dihydroxyvitamin D3(1,25 DHVD3)ELISA kit
绵羊ELISA Kit
绵羊组铵(HIS)ELISA KitSheep histamine,HIS ELISA kit
绵羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA KitSheep Tumor Necrosis Factor α,TNF-α ELISA Kit
绵羊中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA KitSheep neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL ELISA Kit
绵羊脂联素(ADIPOQ)ELISA KitSheep adiponectin,ADIPOQ ELISA kit
绵羊孕酮受体(PGR)ELISA KitSheep progesterone receptor,PGR ELISA Kit
绵羊孕激素/孕酮(PROG)ELISA KitSheep Progesterone,PROG ELISA Kit
绵羊游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA KitSheep free tri-iodothyronine indes,FT3 ELISA kit
绵羊游离甲状腺素(FT4)ELISA KitSheep free thyroxine,FT4 ELISA kit
绵羊胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA KitSheep insulin-like growth factor 1,IGF-1 ELISA Kit
绵羊胰岛素(INS)ELISA KitSheep Insulin,INS ELISA Kit
绵羊血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA KitSheep Serum Amyloid A,SAA ELISA Kit
绵羊血管生成素2(ANG-2/ANGPT2)ELISA KitSheep angiopoietin 2,ANG-2/ANGPT2 ELISA kit
绵羊褪黑素(MT)ELISA KitSheep Melatonin,MT ELISA Kit
绵羊铜蓝蛋白(CP)ELISA KitSheep Ceruloplasmin,CP ELISA Kit
绵羊甜菜碱-同型半胱氨酸S-甲基转移酶1(BHMT)ELISA KitSheep Betaine－－homocysteine S-methyltransferase 1,BHMT ELISA kit
绵羊髓过氧化物酶(MPO)ELISA KitSheep myeloperoxidase,MPO ELISA kit
绵羊双氢睾酮(DHT)ELISA KitSheep Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit
质粒 ( 载体 ) 系列产品2μg绵羊生长激素(GH)ELISA KitSheep Somatotropin,GH ELISA kit
绵羊三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA KitSheep tri-iodothyronine(T3)ELISA kit
绵羊溶菌酶(LZM)ELISA KitSheep Lysozyme,LZM ELISA Kit
绵羊热休克蛋白70(HSP⁻⁷0)ELISA KitSheep heat shock protein 70,HSP⁻⁷0 ELISA
绵羊皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA KitSheep corticosterone,CORT ELISA kit
绵羊皮质醇(Cortisol)ELISA KitSheep Cortisol ELISA Kit
绵羊内皮素1受体(EDNRA)ELISA KitSheep Endothelin-1 receptor,EDNRA ELISA ki
绵羊缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素(MIS/AMH)ELISA KitSheep Mullerian Inhibiting Substance/Anti-Mullerian hormone,MIS/AMH ELISA Kit
绵羊免疫球蛋白M(IgM)ELISA KitSheep Immunoglobulin M,IgM ELISA Kit
绵羊免疫球蛋白G(IgG)ELISA KitSheep Immunoglobulin G,IgG ELISA Kit
绵羊免疫球蛋白E(IgE)ELISA KitSheep Immunoglobulin E,IgE ELISA Kit
绵羊免疫球蛋白A(IgA)ELISA KitSheep Immunoglobulin A,IgA ELISA Kit
绵羊卵泡刺激素(FSH)ELISA KitSheep Follicle Stimulating Hormone,FSH ELISA kit
绵羊粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA KitSheep Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit
绵羊口蹄疫(FMDV)抗体(IgM)ELISA KitSheep antibody against Foot ａnd Mouth Disease(FMDV)IgM ELISA Kit
绵羊抗弓形虫抗体(IgM)ELISA KitSheep anti-toxoplasmosis antibody IgM ELISA kit
绵羊抗弓形虫抗体(IgG)ELISA KitSheep anti-toxoplasmosis antibody IgG ELISA kit
绵羊巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA KitSheep Macrophage Colony-Stimulating Factor,M-CSF ELISA Kit
绵羊结合珠蛋白/触珠蛋白(HP)ELISA KitSheep haptoglobin,HP ELISA kit
绵羊窖蛋白Caveolin-1(CAV1)ELISA KitSheep Caveolin-1,CAV1 ELISA kit
绵羊甲状腺素(T4)ELISA KitSheep thyroxine(T4)ELISA kit
绵羊基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP9/Gelatinase B)ELISA KitSheep matrix metallopeptidase 9,MMP9 ELISA kit
绵羊基质金属蛋白酶3(MMP3)ELISA KitSheep matrix metallopeptidase 3(stromelysin 1,progelatinase)(MMP3)ELISA kit
克隆及表达
