联系我们
联系人：吴菲
产品展示
克必隆零背景 T 载体20 次
点击次数：167
价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
吴*
联系我时，请说明是阿仪网看到的，谢谢!
- 电话: 02*******773
- 手机: 18******584
- 微信:
- 交换名片后展示联系方式 → →
相关标签：克隆及表达
详细内容
克必隆零背景 T 载体20 次运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
克必隆零背景 T 载体20 次1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
克必隆零背景 T 载体20 次产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
绵羊基质金属蛋白酶1(MMP1)ELISA KitSheep matrix metallopeptidase 1(interstitial collagenase)(MMP1)ELISA kit
绵羊饥饿激素(GHRL)ELISA KitSheep ghrelin/obestatin prepropeptide,GHRL ELISA kit
绵羊黄体生成素(LH)ELISA KitSheep Luteinizing Hormone,LH ELISA Kit
绵羊环磷酸腺苷(cAMP)ELISA KitSheep cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA Kit
绵羊环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA KitSheep cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit
绵羊花生四烯酸(AA)ELISA KitSheep arachidonic Acid,AA ELISA kit
绵羊骨钙素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA KitSheep Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA kit
绵羊睾酮(T)ELISA KitSheep Testosterone(T)ELISA kit
绵羊甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)ELISA KitSheep Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH ELISA kit
绵羊肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)ELISA KitSheep pulmonary surfactant-associated protein C,SP-C ELISA Kit
绵羊肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)ELISA KitSheep pulmonary surfactant-associated protein B,SP-B ELISA Kit
绵羊非酯化脂肪酸(NEFA)ELISA KitSheep non-ester fatty acid,NEFA ELISA kit
绵羊二醇受体(ER-Alpha)ELISA KitSheep Estradiol Receptor Alpha,ER-Alpha ELISA Kit
绵羊弹性蛋白酶2,中性粒细胞(ELA2)ELISA KitSheep elastase 2,neutrophil(ELA2)ELISA kit
绵羊催产素(OT)ELISA KitSheep oxytocin,OT ELISA Kit
绵羊雌二醇(E2)ELISA KitSheep Estradiol,E2 ELISA Kit
绵羊成纤维细胞生长因子23(FGF23)ELISA KitSheep Fibroblast Growth Factor 23,FGF23 ELISA Kit
绵羊补体片段3a(C3a)ELISA KitSheep complement fragment 3a,C3a ELISA kit
绵羊白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA KitSheep Interleukin-8,IL-8 ELISA Kit
绵羊白介素6(IL-6)ELISA KitSheep Interleukin 6,IL-6 ELISA Kit
绵羊白介素4(IL-4)ELISA KitSheep Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit
绵羊白介素1α(IL-1α)ELISA KitSheep Interleukin 1α,IL-1α ELISA Kit
绵羊白介素13(IL-13)ELISA KitSheep interleukin 13,IL-13 ELISA kit
绵羊白介素12(IL-12)ELISA KitSheep Interleukin 12,IL-12 ELISA Kit
绵羊白介素10(IL-10)ELISA KitSheep Interleukin 10,IL-10 ELISA Kit
绵羊白蛋白(Albumin)ELISA KitSheep Albumin ELISA Kit
绵羊γ干扰素(IFN-γ)ELISA KitSheep Interferon γ ,IFN-γ ELISA Kit
绵羊C反应蛋白(CRP)ELISA KitSheep C-reactive protein,CRP ELISA Kit
绵羊5羟色铵/血清素/血清铵(5HT/ST)ELISA KitSheep 5-hydroxytryptamine/serotonin,5HT/ST ELISA kit
绵羊5羟二十碳四烯酸(5-HETE)ELISA KitSheep 5-hydroxyeicosatetraenoic acid,5-HETE ELISA kit
绵羊3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA KitSheep 3-nitrotyrosine,3-NT ELISA Kit
绵羊Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA KitSheep collagen type Ⅱ,Col Ⅱ ELISA kit
绵羊17羟孕酮(17-OHP)ELISA KitSheep 17-Hydroxyprogesterone,17-OHP ELISA Kit
猫ELISA Kit
猫肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA KitCat tumor necrosis factor α,TNF-α ELISA Kit
猫孕激素/孕酮(PROG)ELISA KitCat Progesterone,PROG ELISA Kit
克必隆零背景 T 载体20 次猫游离三碘甲状腺原氨酸(Free-T3)ELISA KitCat Free Tri-iodothyronine Indes,FREE-T3 ELISA Kit
猫游离甲状腺素(FT4)ELISA KitCat Free Thyroxine,FT4 ELISA Kit
猫血管内皮细胞生长因子(VEGF)ELISA KitCat vascular Endothelial cell Growth Factor,VEGF ELISA Kit
猫碳酸酐酶9(CA9)ELISA KitCat Carbonic Anhydrase 9,CA9 ELISA Kit
猫嗜酸粒细胞趋化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA KitCat Eotaxin 1 ELISA Kit
猫生长激素(GH)ELISA KitCat growth hormone,GH ELISA Kit
猫三碘甲状腺原氨酸(T3)ELISA KitCat Tri-iodothyronine(T3)ELISA Kit
猫脑源性神经营养因子(BDNF)ELISA KitCat Brain-derived neurotrophic factor,BDNF ELISA kit
猫窖蛋白Caveolin-1(CAV1)ELISA KitCat Caveolin-1,CAV1 ELISA kit
猫甲状腺素(T4)ELISA KitCat thyroxine(T4)ELISA Kit
猫甲状旁腺激素(PTH)ELISA KitCat Parathyroid hormone,PTH ELISA Kit
猫黄体生成素(LH)ELISA KitCat luteinizing hormone,LH ELISA kit
猫睾酮(T)ELISA KitCat testosterone(T)ELISA kit
猫多巴铵(DA)ELISA KitCat dopamine,DA ELISA Kit
猫单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)ELISA KitCat Monocyte Chemotactic Protein 1,MCP1 ELISA Kit
猫促甲状腺素(TSH)ELISA KitCat Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit
猫雌二醇(E2)ELISA KitCat Estradiol(E2)ELISA Kit
克隆及表达
