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即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次
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价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
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吴*
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相关标签：克隆及表达
详细内容
即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
鸡转化生长因子β3(TGFB3)ELISA KitChicken Transforming growth factor beta-3,TGFB3 ELISA kit
鸡转化生长因子β1(TGF-β1)ELISA KitChicken Transforming Growth factor β1,TGF-β1 ELISA kit
鸡肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(TRAIL-R3)ELISA KitChicken TRAIL-R3 ELISA Kit
鸡肿瘤坏死因子β(TNF-β)ELISA KitChicken tumor necrosis factor β,TNF-β ELISA Kit
鸡脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)ELISA KitChicken Adipose Triglyceride Lipase,ATGL ELISA Kit
鸡脂蛋白脂酶(LPL)ELISA KitChicken lipoprotein lipase,LPL ELISA Kit
鸡孕激素/孕酮(PROG)ELISA KitChicken progesterone,PROG ELISA Kit
鸡游离脂肪酸(FFA)ELISA KitChicken free fatty acids,FFA ELISA kit
鸡抑制素B(INH-B)ELISA KitChicken inhibin B,INH-B ELISA Kit
鸡抑制素A(INH-A)ELISA KitChicken Inhibin A,INH-A ELISA Kit
鸡乙酰辅酶A羧化酶α(ACACA)ELISA KitChinken acetyl-Coenzyme A carboxylase alpha,ACACA ELISA kit
鸡胰高血糖素(GC)ELISA KitChicken Glucagon,GC ELISA Kit
鸡胰岛素样生长因子2(IGF2)ELISA KitChicken Insulin-like growth factor II,IGF2 ELISA kit
鸡胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA KitChicken Insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISA Kit
鸡胰岛素(INS)ELISA KitChicken Insulin,INS ELISA kit
鸡延伸因子Tu,线粒体(TUFM)ELISA KitChicken Elongation factor Tu,mitochondrial,TUFM ELISA kit
鸡烟酰铵腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA KitChicken nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit
鸡血清淀粉样蛋白A(SAA)ELISA KitChicken serum amyloid A,SAA ELISA kit
鸡血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA KitChicken Vascular cell adhesion molecule 1,VCAM-1 ELISA kit
鸡血管内皮细胞生长因子B(VEGF-B)ELISA KitChicken Vascular Endothelial cell Growth Factor B,VEGF-B ELISA KIT
鸡血管内皮细胞生长因子A(VEGF-A)ELISA KitChicken Vascular Endothelial cell Growth Factor A,VEGF-A ELISA KIT
鸡血管紧张素Ⅱ(ANG-Ⅱ)ELISA KitChicken angiotension Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit
鸡血管紧张素Ⅰ(ANG-Ⅰ)ELISA KitChicken angiotension Ⅰ,ANG-Ⅰ ELISA Kit
鸡新喋呤(NEOP)ELISA KitChicken neopterin,NEOP ELISA kit
鸡新城疫病毒(NDV)抗体ELISA KitChicken newcastle disease virus(NDV)antibody ELISA kit
鸡维生素H(VH)ELISA KitChicken vitamin H,VH ELISA Kit
鸡维生素D结合蛋白(VDBP)ELISA KitChicken vitamin D-binding protein,VDBP ELISA kit
鸡褪黑素(MT)ELISA KitChicken melatonin,MT ELISA kit
鸡铜蓝蛋白(CP)ELISA KitChicken Ceruloplasmin,CP ELISA Kit
鸡天门冬氨酸氨基转移酶(AST)ELISA KitChicken Aspartate aminotransferase,AST ELISA Kit
鸡糖皮质激素(GC)ELISA KitChicken glucocorticoid，GC ELISA Kit
鸡髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA KitChicken Myelin basic protein,MBP ELISA kit
鸡瘦素(LEP)ELISA KitChicken Leptin,LEP ELISA kit
鸡生长激素(GH)ELISA KitChicken growth hormone,GH ELISA KIT
即用型蓝白 T 载体 E 型 ( 无启动子，无 MCS)20 次鸡肾素(Renin)ELISA KitChicken Renin ELISA Kit
鸡肾上腺髓质素(ADM)ELISA KitChicken adrenomedullin,ADM ELISA Kit
鸡肾上腺素(EPI)ELISA KitChicken Epinephrine/Adrenaline,EPI ELISA Kit
鸡神经调节蛋白1(NRG1)ELISA KitChicken neuregulin-1,NRG1 ELISA kit
鸡溶菌酶(LZM)ELISA KitChicken Lysozyme,LZM ELISA Kit
鸡热休克蛋白90(HSP-90)ELISA KitChicken Heat Shock Protein 90,HSP-90 ELISA Kit
鸡热休克蛋白72(HSP⁻⁷2)ELISA KitChicken Heat Shock Protein 72,HSP⁻⁷2 ELISA Kit
鸡热休克蛋白70(HSP⁻⁷0)ELISA KitChicken Heat Shock Protein 70,Hsp⁻⁷0 ELISA Kit
鸡热休克蛋白40(HSP-40)ELISA KitChicken Heat Shock Protein 40,HSP-40 ELISA Kit
鸡热休克蛋白27(HSP-27)ELISA KitChicken Heat Shock Protein 27,HSP-27 ELISA Kit
鸡热休克蛋白20(HSP-20)ELISA KitChicken Heat Shock Protein 20,HSP-20 ELISA Kit
鸡去甲肾上腺素(NA)ELISA KitChicken Noradrenaline,NA ELISA Kit
克隆及表达
