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克必隆 G 载体2μ
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价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
吴*
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相关标签：克隆及表达
详细内容
克必隆 G 载体2μ运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
克必隆 G 载体2μ5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
克必隆 G 载体2μ产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
大鼠转录因子P65(RELA)ELISA KitRat transcription factor p65,RELA ELISA kit
大鼠转甲状腺素蛋白(TTR)ELISA KitRat Transthyretin,TTR ELISA Kit
大鼠转化生长因子β3(TGF-β3)ELISA KitRat Transforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA Kit
大鼠转化生长因子β2受体(TGF-β2R)ELISA KitRat transforming growth factor β2 receptor,TGF-β2R ELISA Kit
大鼠转化生长因子β2(TGF-β2)ELISA KitRat Transforming Growth factor β2,TGF-β2 ELISA kit
大鼠转化生长因子β1受体(TGF-β1R)ELISA KitRat Transforming Growth factor β1 receptor,TGF-β1R ELISA kit
大鼠昼夜节律蛋白同源物2(PER2)ELISA KitRat Period circadian protein homolog 2,PER2 ELISA kit
大鼠周脂素(Plin1/Peri/Plin)ELISA KitRat Perilipin-1,Plin1/Peri/Plin ELISA kit
大鼠周期素依赖性激酶5(CDK5)ELISA KitRat Cyclin Dependent Kinase 5,CDK5 ELISA Kit
大鼠肿瘤转移抑制基因KISS1蛋白（KISS1/Kisspeptin 1)ELISA KitRat Kisspeptin 1,KISS1 ELISA Kit
大鼠肿瘤特异生长因子(TSGF)ELISA KitRat Tumor Specific Growth Facter/tumor supplied group of factor,TSGF ELISA Kit
大鼠肿瘤坏死因子诱导蛋白6(TSG-6)ELISA KitRat tumor necrosis factor-inducible gene 6 protein,TSG-6 elisa kit
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(TRAIL-R4)ELISA KitRat TRAIL-R4 ELISA Kit
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(TRAIL-R3)ELISA KitRat TRAIL R3 ELISA Kit
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体1(TRAIL-R1)ELISA KitRat TRAIL-R1 ELISA Kit
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)ELISA KitRat tumor necrosis factor-related apoptosis inducing ligand,TRAIL ELISA Kit
大鼠肿瘤坏死因子受体超家族成员11A(TNFRSF11A/RANK)ELISA KitRat tumor necrosis factor receptor superfamily member 11A,TNFRSF11A/RANK ELISA kit
大鼠肿瘤坏死因子γ(TNF-γ)ELISA KitRat tumor necrosis factor γ,TNF-γ ELISA Kit
大鼠肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA KitRat Tumor necrosis factor α ,TNF-α ELISA kit
大鼠肿瘤坏死因子(配体)超家族成员14(TNFSF14)ELISA KitRat tumor necrosis factor(ligand)superfamily, member 14,TNFSF14 ELISA kit
大鼠中性粒细胞趋化因子(CINC)ELISA KitRat cytokine-induced neutrophil chemoattractant,CINC ELISA Kit
大鼠质膜钙ATP酶(PMCA)ELISA KitRat Plasma membrane calcium-transporting ATPase 2,PMCA Elisa kit
大鼠脂氧素A4(LXA4)ELISA KitRat Lipoxin A4,LXA4 ELISA Kit
大鼠脂肪酸结合蛋白4,脂肪细胞型(FABP4)ELISA KitRat fatty acid binding protein 4,adipocyte(FABP4)ELISA kit
大鼠脂肪酸合成酶(FAS)ELISA KitRat fatty acid synthase,FAS ELISA kit
大鼠脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)ELISA KitRat Adipose Triglyceride Lipase,ATGL ELISA Kit
大鼠脂多糖结合蛋白(LBP)ELISA KitRat lipolysaccharide binding protein,LBP ELISA Kit
大鼠脂多糖/内毒素(LPS)ELISA KitRat Lipopolysaccharides,LPS ELISA Kit
大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)ELISA KitRat lipoprotein-associated phospholipase A2,Lp-PLA2 ELISA Kit
大鼠正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)ELISA KitRat RANTES ELISA kit
大鼠整合素样金属蛋白酶17(ADAM17)ELISA KitRat ADAM metallopeptidase domain 17,ADAM17 ELISA kit
大鼠整合素αM型((ITG αM/CD11b)ELISA KitRat Integrin αM,ITG/CD11b ELISA Kit
大鼠整合素α2+β1(ITGA2+ITGB1)ELISA KitRat integrin alpha-2+beta-1,ITGA2+ITGB1 ELISA kit
大鼠整合素α2(ITGA2)ELISA KitRat integrin alpha-2,ITGA2 ELISA kit
大鼠蔗糖酶异麦芽糖酶(SI)ELISA KitRat Sucrase-Isomaltase,SI ELISA Kit
克必隆 G 载体2μ大鼠粘胶蛋白/肌腱蛋白C(TN-C)ELISA KitRat Tenascin-C,TN-C ELISA Kit
大鼠粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA KitRat mucin-5 subtype B,MUC5B ELISA kit
大鼠粘蛋白/粘液素5AC(MUC5AC)ELISA KitRat Mucin-5 subtype AC,MUC5AC ELISA Kit
大鼠粘蛋白/粘液素1(MUC1)ELISA KitRat Mucin-1,MUC1 ELISA kit
大鼠再生基因蛋白1a(REG-1a)ELISA KitRat regenerating gene 1a,REG-1a ELISA Kit
大鼠载脂蛋白H(Apo-H)ELISA KitRat apolipoprotein H,Apo-H ELISA Kit
大鼠载脂蛋白C-II(APOC2)ELISARat apolipoprotein C-II,APOC2 ELISA kit
大鼠载脂蛋白C-I(APOC1)ELISA KitRat apolipoprotein C-I,APOC1 ELISA kit
大鼠载脂蛋白B-48(ApoB48)ELISA KitRat apolipoprotein B-48,ApoB48 ELISA kit
大鼠载脂蛋白A5(apo-A5)ELISA KitRat Apolipoprotein A5,apo-A5 ELISA Kit
大鼠载脂蛋白A1前体(Pre-Apo-A1)ELISA KitRat apolipoprotein A1 precursor,Pre-Apo-A1 ELISA kit
大鼠孕酮受体(PROGR)ELISA KitRat Progesterone receptor,PROGR ELISA kit
克隆及表达
