联系我们
联系人：吴菲
产品展示
DNA 去磷酸化试剂盒20 次
点击次数：446
价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
吴*
联系我时，请说明是阿仪网看到的，谢谢!
- 电话: 02*******773
- 手机: 18******584
- 微信:
- 交换名片后展示联系方式 → →
相关标签：克隆及表达
详细内容
DNA 去磷酸化试剂盒20 次产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
DNA 去磷酸化试剂盒20 次使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需DNA 去磷酸化试剂盒20 次根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。
大鼠钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)抗体(IgG)ELISA KitRat keyhole limpet hemocyanin(KLH)antibody(IgG)ELISA kit
大鼠诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA KitRat inducible nitric oxide synthase,iNOS ELISA KIT
大鼠游离原卟啉(FEP)ELISA KitRat Free erythrocyte proloporphyrin,FEP ELISA Kit
大鼠游离肉碱ELISA KitRat Free Carnitine ELISA Kit
大鼠游离雌三醇(FE3)ELISA KitRat free Estriol,FE3 ELISA Kit
大鼠硬脂酰辅酶A去饱和酶1(SCD1)ELISA KitRat Acyl-CoA desaturase 1,Scd1/Scd ELISA kit
大鼠吲哚铵2,3-双加氧酶(IDO)ELISA KitRat Indoleamine 2,3-dioxygenase,IDO ELISA Kit
大鼠抑胃肽(GIP)ELISA KitRat gastric inhibitory polypeptide,Gip ELISA kit
大鼠抑瘤素M受体(OSMR)ELISA KitRat Oncostatin-M-specific receptor subunit beta,OSMR ELISA kit
大鼠异柠檬酸脱氢酶(ICD)ELISA KitRat isocitrate dehydrogenase,ICD ELISA Kit
大鼠乙酰辅酶A羧化酶合成酶(ACC)ELISA KitRat Acetyl-CoA Carboxylase Synthetase,ACC ELISA Kit
大鼠乙酰辅酶A ELISA KitRat acetyl-CoA ELISA Kit
大鼠乙酰胆碱酯酶(AChE)ELISA KitRat Acetylcholinesterase,AChE ELISA Kit
大鼠胰脂肪酶(PL)ELISA KitRat Pancreatic Lipase,PL ELISA Kit
大鼠胰高血糖素样肽2(Glp-2)ELISA KitRat glucagon-like peptide-2,GLP-2 ELISA Kit
大鼠胰高血糖素(GC)ELISA KitRat Glucagon,GC ELISA Kit
大鼠胰多肽 ELISA KitRat Pancreatic prohormone,PPY ELISA kit
大鼠胰淀粉酶α2A(AMY2A)ELISA KitRat Pancreatic alpha-amylase,AMY2A ELISA kit
大鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISA KitRat insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit
大鼠胰岛素样因子3(INSL3)ELISA KitRat Insulin-Like 3,INSL3 ELISA Kit
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)ELISA KitRat insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA Kit
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白5(IGFBP-5)ELISA KitRat Insulin-like growth factor binding protein 5,IGFBP-5 ELISA kit
大鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)ELISA KitRat Insulin-like growth factor binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit
大鼠胰岛素受体底物2(IRS2)ELISA KitRat insulin receptor substrate 2,IRS2 ELISA Kit
大鼠胰岛素受体底物1(IRS-1)ELISA KitRat insulin receptor substrate-1,IRS-1 ELISA Kit
大鼠胰岛素降解酶(IDE)ELISA KitRat Insulin-degrading Enzyme,IDE ELISA Kit
大鼠胰蛋白酶原酶(Try)ELISA KitRat Trypsinogen,Try ELISA Kit
大鼠胰蛋白酶原1 ELISA KitRat trypsinogen 1 ELISA Kit
大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA KitRat trypsin ELISA Kit
大鼠一氧化碳血红蛋白(HbCO)ELISA KitRat Carboxyhemoglobin,HbCO ELISA Kit
大鼠氧还原蛋白过氧化物酶2(PRDX2)ELISA KitRat Peroxiredoxin 2,PRDX2 ELISA Kit
大鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA KitRat oxidizided glutathione,GSSG ELISA Kit
DNA 去磷酸化试剂盒20 次大鼠牙本质磷蛋白(DPP)ELISA KitRat dentin phosphoproteins,DPP ELISA kit
大鼠牙本质基质蛋白1(DMP1)ELISA KitRat Dentin Matrix Protein 1,DMP1 ELISA Kit
大鼠循环免疫复合物(CIC)ELISA KitRat circulating immune complex,CIC ELISA Kit
大鼠血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA KitRat Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit
大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA KitRat platelet factor 3,PF-3 ELISA kit
大鼠血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)ELISA KitRat platelet-derived growth factor-BB,PDGF-BB ELISA Kit
大鼠血小板衍生生长因子B(PDGF-B)ELISA KitRat platelet-derived growth factor-B,PDGF-B ELISA Kit
大鼠血小板衍生生长因子AA(PDGF-AA)ELISA KitRat Platelet-Derived Growth Factor AA,PDGF-AA ELISA kit
大鼠血小板衍生生长因子A(PDGF-A)ELISA KitRat Platelet-Derived Growth Factor A,PDGF-A ELISA kit
大鼠血小板膜糖蛋白IIb(GPIIb)ELISA KitRat Platelet membrane glycoprotein IIb,GPIIb ELISA Kit
大鼠血小板膜糖蛋白Ib(GPIb)ELISA KitRat Platelet membrane glycoprotein Ib,GPIb ELISA Kit
大鼠血栓素合成酶(TXAS)ELISA KitRat thromboxane synthase,TXAS ELISA Kit
大鼠血栓素A2(TXA2)ELISA KitRat Thromboxane A2,TXA2 ELISA Kit
大鼠血清素受体2A/5-羟色铵受体2A(5-HT-2A)ELISA KitRat Serotonin Receptor 2A/5-hydroxytryptamine Receptor 2A(5-HT-2A)ELISA Kit
克隆及表达
