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DNA 磷酸化试剂盒20 次
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价格：￥电议
更新日期：2026/8/7 17:04:43
生 产 地：中国大陆
产品型号：
商家名片
吴*
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相关标签：克隆及表达
详细内容
DNA 磷酸化试剂盒20 次运输及保存:
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
常温运输和保存，但介质需 4℃保存，PMSF 需要-20℃保存，有效期一年。自备试剂 去离子水、20%乙醇、0.22 μm 或 0.45 μm 滤膜
使用方法
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
1. 将直链淀粉-琼脂糖介质充分混匀后，取适量加入到预放了一片筛板的层析柱中（介质用量需要根据 MBP 蛋白产量决定，其最大载量为 10 mg MBP蛋白/mL 介质，请根据实验需要取适量的介质加入层析柱中）。
2. 用 5 倍柱体积（柱体积指的是填料介质的体积，下同）自备去离子水洗柱，共 3 次。
3) 用传统的层析方法或 SDS-PAGE 电泳分离靶蛋白和蛋白酶。3. 用 5 倍柱体积的新配的结合缓冲液洗柱，进行平衡，使填料介质处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。
4. 4℃ 5000 g 离心 10 分钟收集 20 mL 表达菌液，弃上清，将细胞沉淀（约100 mg）悬于 2 mL 冰冷的现配的细胞洗涤液中，4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞沉淀后，再次悬于 2 mL 冰冷的细胞洗涤液中。
DNA 磷酸化试剂盒20 次5. 制备细胞裂解物：
1) 如果所用载体不带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-c2）a) 超声破碎细胞，功率 30 W，保持细胞低温（0℃），直到在显微镜下看见绝大多数细胞破裂。（超声参数需根据仪器型号自行摸索，但裂解物必须不粘稠，否则会堵塞层析柱。）b) 为使溶液澄清，向上述细胞洗涤液中加入 35 uL PMSF（10mg/mL）。c) 4℃下 13000-15000 g 离心 30 分钟，以去除残留细胞和细胞碎片
以防堵柱，收集上清样品，留样做 SDS-PAGE 电泳对照，其余样品用于纯化 MBP 融合蛋白，直接进入第 6 步。
2) 如果所用载体带 MBP 信号肽序列（如 pMAL-p2）a) 4℃ 5000 g 离心 15 分钟收集细胞，沉淀悬于 1 mL 冰冷的现配的细胞裂解液中。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
6. 将样品加到平衡好的直链淀粉-琼脂糖介质中（保证目的蛋白与介质充分接触，以提高目的蛋白的回收率），收集流出液。
7. 用 10-15 倍柱体积的结合缓冲液（配方见上表）进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。
8. 使用 5-10 倍柱体积的现配的麦芽糖洗脱液洗脱结合的融合蛋白，收集洗脱液（即目的蛋白组分）。
11. 用适当的蛋白酶切割融合蛋白释放靶蛋白。
1) 加入自备的凝血酶、肠激酶或 Xa 因子（根据融合蛋白中的位点选择）。每毫升介质中加入 50 单位的溶于 1 mL PBS 溶液的蛋白酶。颠倒离心管数次混匀，室温下振荡 2-16 小时。
2) 4℃以 500 g 离心 5 分钟，上清小心转移到新离心管中。
DNA 磷酸化试剂盒20 次产品及特点:
MBP（麦芽糖结合蛋白，Maltose Binding Protein）标签蛋白大小为 40kDa，由 的 malE 基因编码。MBP 可增加在细菌中过量表达的融合蛋白的溶解性，尤其是真核蛋白。如果蛋白在细菌中表达，MBP 可以融合在蛋白的 N 端或 C 端。MBP 融合蛋白可通过交联淀粉亲和层析一步纯化，结合的融合蛋白可用 10 mM 麦芽糖在生理缓冲液中进行洗脱。如果要去除 MBP 融合部分，可用位点特异性蛋白酶切除。可用 MBP 抗体或表达的目的蛋白特异性抗
体检测 MBP 标签标记的重组蛋白。由于 MBP 融合蛋白原核表达载体具有表达效率高，易于纯化等优点。在现代分子克隆中 MBP 常作为融合蛋白被广泛应用。
本产品就是专门用于分离纯化 MBP 融合蛋白的试剂盒，它具有下列特点：
1. 一站式套装，含所需的直链淀粉和琼脂糖介质、溶液和层析柱，操作非常方便。
2. 提供 2 mL 直链淀粉-琼脂糖介质，其最大载量为 10 mg MBP 蛋白/mL介质。
3. 采用麦芽糖温和洗脱，无去污剂和变性剂对蛋白活性的影响。
4. 本介质可以反复使用多次。
大鼠血清素(5-羟色铵)-N-乙酰基转移酶(AANAT)ELISA KitRat Serotonin N-acetyltransferase,AANAT ELISA kit
大鼠血浆α颗粒膜蛋白(GMP-140)ELISA KitRat alpha-granular membrane protein,GMP-140 ELISA Kit
大鼠血红素结合蛋白(HPX)ELISA KitRat hemopexin,HPX ELISA Kit
大鼠血管性血友病因子裂解酶(vWF-cp)ELISA KitRat von Willebrand Factor cleaving protease,ADAMTS-13/vWF-cp ELISA Kit
大鼠血管生成抑制因子ELISA KitRat arresten ELISA kit
大鼠血管生成素样蛋白6(ANGPTL6)ELISA KitRat Angiopoietin-like 6,ANGPTL6 ELISA KIT
大鼠血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA KitRat Angiopoietin-like 3,ANGPTL3 ELISA KIT
大鼠血管内皮细胞粘附分子1(VCAM-1)ELISA KitRat vascular cell adhesion protein 1,VCAM-1/CD106 ELISA kit
大鼠血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR-2)ELISA KitRat Vascular endothelial cell growth factor receptor 2,VEGFR-2/Flk-1 ELISA kit
大鼠血管紧张素转化酶2(ACE2)ELISA KitRat Angiotensin converting enzyme 2,ACE2 ELISA Kit
大鼠血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)抗体ELISA KitRat angiotensin Ⅱ receptor type 1(AT1R)antibody ELISA Kit
大鼠血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)ELISA KitRat angiotensin Ⅱ receptor type 1,AT1R ELISA Kit
大鼠血管紧张素1⁻⁷(Ang1⁻⁷)ELISA KitRat angiotension 1⁻⁷,Ang1⁻⁷ ELISA kit
大鼠血管动蛋白(AMOT)ELISA KitRat angiomotin,AMOT ELISA kit
大鼠胸腺素β-4(TMSB4X)ELISA KitRat Thymosin beta-4,TMSB4X ELISA kit
大鼠胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)ELISA KitRat thymic stromal lymphopoietin,TSLP ELISA Kit
大鼠胸腺表达趋化因子25(TECK/CCL25)ELISA KitRat thymus expressed chemokine25,TECK25 ELISA Kit
大鼠新喋呤ELISA KitRat Neopterin ELISA Kit
大鼠锌金属硫蛋白(Zn-MT)ELISA KitRat Zn-Metallothionein,Zn-MT ELISA Kit
大鼠心肌肌钙蛋白T(cTn-T)ELISA KitRat Cardiac Troponin T,cTn-T ELISA kit
大鼠心肌肌钙蛋白C(TnC)ELISA KitRat Cardiac Troponin C,cTn-C ELISA kit
大鼠腺苷酸环化酶1(AC-1)ELISA KitRat adenylyl cyclase 1,AC-1 ELISA Kit
大鼠腺苷受体A2a(ADORA2A)ELISA KitRat Adenosine receptor A2a,ADORA2A ELISA kit
大鼠腺苷受体A1(ADORA1)ELISA KitRat Adenosine receptor A1,ADORA1 ELISA kit
大鼠腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)ELISA KitRat ATP-binding Cassette Transporter A1,ABCA1 ELISA Kit
大鼠腺病毒抗体(FL/K87-Ab)ELISA KitRat Adenovirus Antibody,FL/K87-Ab ELISA Kit
大鼠腺病毒(ADV)抗体(IgG)ELISA KitRat adenovirus(ADV)antibody IgG ELISA kit
大鼠酰基化饥饿素(AG)ELISA KitRat Acylated Ghrelin,AG ELISA Kit
大鼠纤维蛋白原γ链(Fgg)ELISA KitRat fibrinogen gamma chain,Fgg ELISA kit
大鼠纤维蛋白原β链(Fgb/Ab1-181/Ab1-216/Ac1-581)ELISA KitRat fibrinogen beta chain ELISA Kit
大鼠纤维蛋白原α链(Fga)ELISA KitRat fibrinogen alpha chain,Fga ELISA kit
大鼠纤维蛋白原(Fb)ELISA KitRat Fibrinogen,Fb Elisa Kit
大鼠纤溶酶原(Plg)ELISA KitRat Plasminogen,Plg ELISA kit
大鼠细胞因子信号转导抑制因子3(SOCS-3)ELISA KitRat suppressors of cytokine signaling 3,SOCS-3 ELISA Kit
大鼠细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS-1)ELISA KitRat suppressors of cytokine signaling 1,SOCS-1 ELISA Kit
大鼠细胞色素P4502E1(CYP2E1)ELISA KitRat cytochrome P450 2E1,CYP2E1 ELISA Kit
DNA 磷酸化试剂盒20 次大鼠细胞色素P450 3A4(CYP3A4)ELISA KitRat Cytochrome P450 3A4,CYP3A4 ELISA Kit
大鼠细胞色素P450 1A1(CYP1A1)ELISA KitRat Cytochrome P450 1A1,CYP1A1 ELISA Kit
大鼠细胞色素C氧化酶(COX)ELISA KitRat cytochrome C oxidase,COX ELISA Kit
大鼠细胞色素b5 ELISA KitRat Cytochrome b5 ELISA Kit
大鼠细胞膜钙转运ATP酶1(ATP2B1)ELISA KitRat Plasma membrane calcium-transporting ATPase 1,ATP2B1 ELISA kit
大鼠细胞角蛋白18-M65(CK 18-M65)ELISA KitRat cytokeratin 18-M65,CK 18-M65 ELISA kit
大鼠细胞角蛋白18-M30(CK 18-M30)ELISA KitRat Cytokeratin 18-M30,CK 18-M30 ELISA kit
大鼠细胞间粘附分子3(ICAM-3)ELISA KitRat intercellular adhesion molecule 3,ICAM-3 ELISA Kit
大鼠细胞间粘附分子2(ICAM-2)ELISA KitRat intercellular adhesion molecule 2,ICAM-2 ELISA Kit
大鼠细胞间粘附分子1(ICAM-1)ELISA KitRat intercellular adhesion molecule 1,ICAM-1 ELISA Kit
大鼠细胞分裂周期基因(CDC)ELISA KitRat cell division cycle gene,CDC ELISA Kit
大鼠细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)ELISA KitRat Cytotoxic T Lymphocyte Associated Antigen 4,CTLA-4 ELISA Kit
大鼠细胞凋亡调节因子BAX(BAX)ELISA KitRat Apoptosis regulator BAX,BAX ELISA kit
大鼠硒蛋白P(SEPP1)ELISA KitRat selenoprotein P, plasma, 1 (SEPP1)ELISA kit
大鼠五聚素3(PTX3)ELISA KitRat Pentraxin 3,PTX3 ELISA Kit
大鼠胃泌酸调节素ELISA KitRat oxyntomodulin ELISA Kit
克隆及表达
