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公司新闻
动物外周血中性粒细胞分离液-赫澎生物研选
点击次数：252发布时间：2021/6/24 9:32:35
“XXXX”动物外周血中性粒细胞分离液 KIT 说明书
【产品规格】
200ml/Kit
【产品组成】
为方便广大用户使用，试剂内容如下：
|
| 名称 | 产品编号 | 规格 |
| A | 分离液 1 |
| 200ml |
| B | 分离液 2 |
| 100ml |
| C | 清洗液（赠品） | 2010X1118 | 200ml |
| D | 红细胞裂解液（赠品） | NH4CL2009 | 100ml |
| E | 说明书 |
| 1 份 |
【实验准备】
1. 适用仪器
大离心力可达 1200g 的水平转子离心机
2. 抗凝剂的选择
在动物实验采血时，很多实验者选择医用真空采血管获得抗凝血，医用采血管中的抗凝 剂只考虑血浆质量，但不利于高纯度细胞分离实验。
为此，特别开发出利抗凝剂及抗凝管用于细胞分离，改变使用普通采血管 获得抗凝血分离效果不佳，提取率及纯度低下的不良结果。
3. 无菌硅化离心管
| 序号 | 产品名称 | 产品货号 | 规格 |
| 1 | 无菌硅化离心管/10m（l 随试剂盒附赠 5 支） | A2015 | 100 支/包 |
【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。
根据样本量大小，分以下两种情况：
情况 A：血液样本量小于 5ml 时，实验方法如下：
1. 取一支无菌硅化离心管，先加入 4ml 分离液 1，后将 2ml 分离液 2 小心叠加于分离液 1
之上，形成梯度界面。
2. 用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上，500-650g ，离心 20-30min（注：如改变血液样本及分离液用量，需相应调整离心力及离心时间，具体离心条件需客户自行摸 索，以达到佳分离效果。）
3. 离心后，离心管中将出现两层环状乳白色细胞层，上层细胞为单个核细胞层，下层细胞 为中性粒细胞层。
4. 用吸管小心吸取分离液中的中性粒细胞层，如有红细胞混杂则加入适量红细胞裂解液
（产品编号：NH4CL2009）将红细胞裂解（具体方法见“红细胞裂解液使用说明”）即得目的细胞。
5. 将获得的细胞层移至另一 15ml 离心管中，向所得离心管中加入 10ml 清洗液（产品编号： 2010X1118），混匀细胞。
6. 250g，离心 10min。
7. 弃上清。
8. 用吸管以 5ml 清洗液（产品编号：2010X1118）重悬所得细胞。
9. 250g，离心 10min。
10. 重复 7、8、9，弃上清后以 0.5ml 后续实验所需相应液体重悬细胞。
情况 B：血液样本量大于等于 5ml 时，实验方法如下：
1. 取一支适当的离心管，依次小心加入分离液 1 及分离液 2（分离液 1 与分离液 2 比例 2： 1）,试剂总量与稀释后的样本量相等。
2. 将血液样本小心加于分离液之液面上，550-750g（大离心力可至 1000g），
离心 20-30min。（注：根据血液样本量确定离心条件，血液量越多，离心力越大，离心时间越长，具体离心条件需客户自行摸索，以达到佳分离效果。加入血液样本后，样 本及分离液总体积不得超过离心管总体积的三分之二）。
3. 剩余步骤同“情况 A”中步骤 3 至步骤 10。
分离图例
1. 全过程样本、试剂及实验环境均需在 20±2℃的条件下进行。为获得佳的实验结果， 好在取血 2h 内进行实验，血液存放时间越长，细胞分离效果越差。血液放置超过 6h 后分离效果更差甚至不能达到分离目的。
2. 本实验好不使用高聚合材质（如聚苯乙烯）的塑料制品，应使用无静电、低静电离心 管及未经碱处理过后的玻璃制品，因为静电作用将导致细胞贴壁、碱处理的玻璃表面会 变成毛面，影响细胞分离效果。
3. 分离液用量大于血液样本时，分离效果更佳。
4. 血液样本不需稀释，直接进行分离即可。
【储存条件及有效期】
常温保存，有效期 2 年。本品易感染细菌，需无菌条件操作。无菌条件下操作，启封后置常温保存。如 4℃保存，本分离液易出现白色结晶，影响分离效果。
