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公司新闻
土壤亮氨酸氨基肽酶（S- LAP）活性检测试剂盒 可见分光光度法
点击次数：273发布时间：2021/3/24 14:24:28
土壤亮氨酸氨基肽酶（S- LAP）活性检测试剂盒说明书
注意：正式测定之选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
货号：YX-C-SLAP
规格：50T/24S
产品内容：
试剂：液体 65mL×1 瓶，4℃保存； 试剂二：粉剂×1 瓶，-20℃保存；
产品说明：
可见分光光度法
S-LAP 是类能水解肽链 N-末端为亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP 活性变化与机体某些病理状态密切相关。
S-LAP 分解 L-亮氨酰对硝基苯胺生成对硝基苯胺，后者在 405nm 有大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算 S-LAP 活性。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水
S-LAP 测定步骤：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 405nm，蒸馏水调零。
2、 在试剂二瓶中加入 30mL 试剂充分溶解（如较难溶解，可 60℃水浴加热约 30min 促进溶解）；在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）水浴 10min 以上；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
3、 操作表
| 试剂名称 | 对照管 | 测定管 |
| 新鲜土样（g） | 0.2 | 0.2 |
| 试剂（μL） | 1200 |
|
| 试剂二（μL） |
| 1200 |
混匀， 37℃振荡反应 1h 后，8000g 4℃离心 10min，取 1mL 上清液于比色皿中，405nm 处测定吸光值 A，计算ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设个对照管。
S-LAP 活力单位的计算：
单位的定义：每天每 g 土样每天生成 1 μmol 对硝基苯胺定义为个酶活力单位。
S-LAP（μmol/d /g 土样）＝ΔA×V 反总÷（ε×d）×106÷W÷T=14.8×ΔA
V 反总：反应体系总体积，1.2×10-3 L；ε：对硝基苯胺摩尔消光系数，9.72×103 L / mol /cm； d：比色皿光径，1cm；T：反应时间，1h=1/24d； W：样本质量，0.2g。
注意事项：
当∆A 大于 1 时，建议将上清液稀释后进行测定；当∆A 小于 0.01 时，建议延长反应时间。计算公式中注意乘以稀释倍数或注意反应时间变化。
