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公司新闻
CNB r-Ad ctivated e Crystarose 4 4 B/4FF 溴化氰活化活化的琼脂糖凝胶4b
点击次数：226发布时间：2019/5/9 9:13:51
CNB r-Ad ctivated e Crystarose 4 4 B/4FF
活性基团：
﹣C≡N
一、 简介
CNBr-Activated Crystarose 4B/4FF 是 CNBr 活化填料，它采用平均粒径为
45－－165μm 的琼脂糖凝胶。该活化填料的活化基团可以结合蛋白质、多肽以及
核酸等其他含有氨基（-HN 2 ）基团的配基。其优点是具有反应条件温和，反应速
度快、活性高、偶联效率高，与市场上同类产品不同的地方是偶联后的配基脱落
极低。
二、 产品技术指标：
特点 适用范围广，操作简单
适用范围 带氨基的物质（多糖，蛋白，核酸，抗体等）
基质(4B/4FF) 琼脂糖凝胶/交联琼脂糖凝胶
功能基团 -C≡N
偶联对象基团 -NH 2
偶联量 15－－30mgBSA/ml 或 15—45mg IgG/ml
平均粒径 90um
粒径范围 45－－165μm
流速范围及最高流速
（4B/4FF）
75－－140cm/h；
750cm/h
最佳偶联条件 pH8-10 ，偶联时间 4℃大于 16 小时或者 25℃大于 1 小时
产品复溶比例 1g 干粉复溶后湿胶体积约 4-4.5ml
保存环境 4-8 摄氏度干燥避光保存， 长期保存-20 摄氏度
三、 适用范围
自制亲和层析填料，提供对不同用户具体的偶联方案。
四、 应用实例
实验名称：偶联牛血清白蛋白（BSA）
实验步骤：
1、 取 BSA 100mg 溶解于 10ml 的 0.1M 碳酸钠缓冲液中，pH8.3。
2、 称量活化填料 1g，（1g 干粉经完全溶胀后体积为 4-4.5ml）。
3、 在抽滤瓶中用 3 倍体积的 1mM HCL 水清洗填料，或用 5 倍体积浸泡填料后
丢弃上清，尽量吸干液体（可选方法：也可不用清洗直接加入偶联蛋白
液进行偶联）。
4、 将清洗后的填料加入 BSA 溶液中混合，在摇床上振荡，室温偶联 1-3 小
时或者 4℃过夜。
5、 然后加用 Tris-HCL 缓冲液或者加入 50mg 甘氨酸，室温反应 2 小时以上
以封闭剩余的基团。
6、 将偶联后的 BSA 的填料装柱子，用 5—10 倍体积的 0.5M NaCl 溶液洗柱，
收集洗脱液。
7、 偶联量测定：
计算方法：BSA 的偶联量=（B0—B1）/V。
注：B0：偶联前 BSA 总蛋白量，单位：mg。
B1：偶联后(洗柱液)未偶联的 BSA 总蛋白量，单位：mg。
V： 填料的体积，单位：ml。
备注：该偶联方法可用于偶联单抗及其它蛋白，均能获得很好的偶联效果。
注意 1：有些大分子蛋白偶联时，在室温下只需要 1-2 小时即可封闭使用，
偶联过长可能反而会导致过度偶联。
注意 2：该凝胶溶胀速度很快，溶胀时间尽可能短，溶胀时间越长，活性损
失越多，直接将粉末加入到偶联蛋白液中可得到最大活性。
注意 3：避免受潮。
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