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技术文章
细胞总胆固醇舒尔茨染色试剂盒产品说明书实验几个优点你知道吗？
点击次数：2693 发布时间：2024/7/22 11:45:08
HEPENGBIO细胞总胆固醇舒尔茨染色试剂盒产品说明书
主要用途
HEPENGBIO细胞总胆固醇舒尔茨染色试剂是一种旨在通过铁矾氧化预处理技术，使用舒尔茨反应试剂特异性与胆固醇反应，形成短暂性蓝绿色显色现象的技术方法。主要适用于各种人体和动物培养细胞株的总胆固醇的检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，显色敏感。
技术背景
胆固醇（cholesterol）是一类称之为固醇类（sterols）或聚类异戊二烯（polyisoprenoid）或三萜皂甙元（triterpene）的多环化合物（polycyclic compound）。其分子式为cholest-5-en-3β-ol。胆固醇以游离（free form）和脂化结合（ester）两种形式广泛存在于所有动物组织中，主要以非脂化形式存在于细胞膜中。在膜功能和脂代谢以及激素合成中起着重要作用。舒尔茨（Schultz Reaction）染色技术通过铁矾氧化预处理，然后使用混合酸还原游离和结合胆固醇，呈现蓝绿色显色。
产品内容
HEPENGBIO清理液（Reagent A） 50毫升
HEPENGBIO固着液（Reagent B） 10毫升
HEPENGBIO氧化液（Reagent C） 10毫升
HEPENGBIO强化液（Reagent D） 20毫升
HEPENGBIO稳定液（Reagent E） 10毫升
HEPENGBIO染色液（Reagent F） 10毫升
产品说明书 1份
保存方式
保存在4℃冰箱里；HEPENGBIO氧化液（Reagent C），避免光照；试剂具有腐蚀性，注意操作安全；保证6月
用户自备
培养箱：用于样品反应孵育
光学显微镜：用于样品染色后观察分析
实验步骤
一、 样本固着处理
1． 取出待测的含有细胞的载玻片
2． 小心加上200微升HEPENGBIO清理液（Reagent A）在载玻片上，铺满整个样品表面
3． 小心移去载玻片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
4． 小心加上200微升HEPENGBIO固着液（Reagent B），铺满整个样品表面
5． 室温下，孵育2分钟
6． 小心移去载玻片上的HEPENGBIO固着液（Reagent B）
7． 小心加上200微升HEPENGBIO清理液（Reagent A），清洗样品表面
8． 小心移去载玻片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
二、样本染色处理
1． 小心加上200微升HEPENGBIO氧化液（Reagent C），铺满整个载玻片样品表面
2． 37℃湿润培养箱孵育4小时，避免光照和干化（注意：如果胆固醇含量较低，建议孵育3天）
3． 小心移去载玻片上的HEPENGBIO氧化液（Reagent C）
4． 小心加上200微升HEPENGBIO强化液（Reagent D）
5． 室温下孵育20分钟
6． 小心移去载玻片上的HEPENGBIO强化液（Reagent D）
7． 重复实验步骤4至6二次
8． 小心加上200微升HEPENGBIO清理液（Reagent A），清洗样品表面
9． 小心移去载玻片上的HEPENGBIO清理液（Reagent A）
10． 小心加上200微升HEPENGBIO稳定液（Reagent E）
11． 室温下孵育10分钟
12． 小心移去载玻片上的HEPENGBIO稳定液（Reagent E）
13． 空气中晾干
14． 小心加上200微升预冷的HEPENGBIO染色液（Reagent F），铺满整个载玻片样品表面
15． 即刻放上盖玻片
16． 在一般光学显微镜下观察：胆固醇阳性呈现蓝绿色
注意事项
1． 本产品为50次操作
2． 试剂含有腐蚀性酸性物质，注意操作安全
3． 操作时，须戴手套
4． 操作时，避免污染母液
5． 试剂溶液在样品表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满样品表面
6． 样品染色完成后，即刻进行光学显微镜观察
7． 染色后数分钟至数小时，载玻片蓝绿色会褪色甚至消失
8． 本公司提供系列组织细胞胆固醇染色试剂产品
原创作者：赫澎（上海）生物科技有限公司
