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技术文章
土壤有效硼试剂盒说明书-微量法/价格-赫澎生物
点击次数：2739 发布时间：2020/9/14 9:14:20
土壤有效硼试剂盒说明书
微量法 100T/96S
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
土壤中有效硼直接影响着植物的吸收和利用。
测定原理
硼与甲亚胺在弱酸条件下形成棕黄色配合物，在 420nm 有特征吸收峰。
自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、震荡仪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板。
试剂组成和配制
试剂一：液体 1mL×1 支，4℃保存。
试剂二：液体 8mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加 4mL 蒸馏水溶解。
样本处理
新鲜土样风干，过 100 目筛，按照土壤质量（g）：蒸馏水体积（mL）为 1：2 的比例（建议
称取约 0.5g 土样，加入 1mL 蒸馏水）加入蒸馏水，沸水中浸提 10min，待自然冷却，加入
50μ L 试剂一，震荡 5min，8000g ，25℃离心 10min，取上清液待测。
测定操作表
空白管 测定管
样本（μL） 40
试剂二（μL） 80 80
试剂三（μL） 40 40
H2O（μL） 80 40
充分混匀，25℃黑暗中静置 1h
于微量石英比色皿/96 孔板，蒸馏水调零，测定 420nm 处吸光值 A，分别记为 A 空白
管和 A 测定管，△A=A 测定管-A 空白管
计算公式
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.3897x - 0.2359，R² = 0.9995
全硼含量（mg/kg）=（△A+0.2359）÷ 0.3897×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）
= 51.32×（△A+0.2359）÷W
V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V 样总：加入提
取液体积，4mL，W：样本质量，g
b. 用 96 孔板测定的计算公式如下
标准曲线：y = 0.1949x - 0.2359，R² = 0.9995
全硼含量（mg/kg）=（△A+0.2359）÷ 0.1949×V 反总÷（W×V 样÷V 样总）
=102.64×（△A+0.2359）÷W
V 反总：反应总体积，0.2mL；V 样：反应体系中加入样本体积，0.04mL；V 样总：加入提
取液体积，4mL，W：样本质量，g
注意事项
1. 配制好的试剂二 4℃保存不可超过 7 天。
2. 显色时严格控制温度并且避光，以免显色剂见光分解。
原创作者：赫澎（上海）生物科技有限公司
