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技术文章
土壤无机磷含量测定试剂盒微量法/价格-赫澎生物
点击次数：2709 发布时间：2020/9/14 9:06:58
土壤无机磷（S-PHOS）含量测定试剂盒说明书
微量法 100T/96S
注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
磷是植物必需大量元素。植物主要通过根系从土壤中获取磷元素。土壤磷包括有机磷和无机
磷。土壤有机磷经过矿化分解而转化为无机磷，才能进一步被植物吸收利用。
测定原理：
从土壤中提取无机磷，在酸性环境中，通过钼蓝法定磷，即可计算出无机磷含量。
自备仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96 孔板、台式离心机、可调式水浴锅，分析天平、
可调式移液器、蒸馏水和 100 目筛子。
试剂组成和配制：
提取液：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1 瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前配制，加入 8mL 蒸馏水，充分溶解后加入 4mL
试剂二，混匀。
标准品：液体×1 支，20μmol/L 无机磷标准液，4℃保存。
土壤无机磷提取：
取 10mL 离心管，加入精确称取的 100 目筛子过筛的风干土样约 0.01g，加入 1mL 提取液，
震荡混匀，然后置于 40℃水浴浸提 1h，8000g，25℃，离心 10min，取上清液，待测。
测定步骤：
1. 分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上，调节波长到 660 nm，蒸馏水调零。
2. 打开水浴锅，调节温度到 40℃。
3. 空白管：取 EP 管，依次加入 100μL 蒸馏水，100μ L 试剂三，混匀后置于 40℃水浴保温
10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，记为 A 空白管。
4. 标准管：取 EP 管，依次加入 10μL 标准液，90μL 蒸馏水，100μL 试剂三，混匀后置于
40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，记为 A 标准管。
5. 测定管：取 EP 管，依次加入 10μL 上清液，90μL 蒸馏水，100μL 试剂三，混匀后置于
40℃水浴保温 10min，室温冷却 10 min 后于 660 nm 测定吸光度，记为 A 测定管。
需在 40min 内完成比色。
注意：空白管和标准管只需测定一次。
土壤无机磷含量计算公式：
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下
S-PHOS（μmol /g 土壤）=[C 标准液×(A 测定－A 空白)÷(A 标准－A 空白)]×V 总÷W
=0.02×(A 测定－A 空白)÷(A 标准－A 空白)÷W
C 标准液：20 μmol/L；V 总：总上清液体积，1 mL=0.001 L；W：土壤样品质量，g。
b.使用 96 孔板测定的计算公式如下
S-PHOS（μmol /g 土壤）=[C 标准液×(A 测定－A 空白)÷(A 标准－A 空白)]×V 总÷W
=0.02×(A 测定－A 空白)÷(A 标准－A 空白)÷W
C 标准液：20 μmol/L；V 总：总上清液体积，1 mL=0.001 L；W：土壤样品质量，g。
注意事项：
1. 试剂三需临用前配制，限当天使用。试剂三配制过程中，可能会产生黑色固体，其不影
响结果，注意吸取时不要将黑色固体吸入。
2. 40min 内完成比色。
原创作者：赫澎（上海）生物科技有限公司
