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赫澎(上海)生物科技有限公司 主营产品:生物试剂,标准品,培养基,elisa试剂盒,多肽合成,实验室仪器耗材

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技术文章

土壤纤维素酶活性测定试剂盒说明书-价格-赫澎生物

点击次数:2772 发布时间:2020/9/11 16:26:46

规格:50管/24样

土壤纤维素酶(Solid-cellulase,S-CL)活性测定试剂盒说明书

可见分光光度法

正式测定前务必取 2-3个预期差异较大的样本做预测定

测定意义:

S-CL主要来源于土壤微生物,S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。

测定原理:

采用3.5-二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

试剂一:甲苯 10mL×1 瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:液体 15mL×1 瓶,4℃保存;

试剂三:液体 50mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:液体 10mL×1 瓶,4℃保存;

加样表和测定步骤:

对照管

测定管

风干土样(g)

0.25

0.25

试剂一(μL)

125

125

煮沸15min(盖紧)

振荡混匀,室温放置15min

试剂二(μL )

250

250

试剂三(μL )

1000

1000

蒸馏水(μL )

250

250

振荡混匀,40℃水浴糖化1h 后,煮沸15min(盖紧,防止水分散失),得糖化液

糖化液(μL)

50

50

试剂四(μL)

150

150

混匀, 沸水浴中煮沸显色15min(盖紧,防止水分散失),冷却

蒸馏水(μL)

1050

1050

混匀,550nm 处蒸馏水调零,测定吸光值A,计算ΔA=A测定管-A对照管

S-CL 活力计算:

标准条件下测定的回归方程为 y = 0.3356x - 0.012;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。

单位的定义:每天每 g 土样中产生 1mg 葡萄糖定义为一个酶活力单位。

S-CL 活力(mg/d/g)=(ΔA+0.012) ÷0.3356×V 反总÷W÷T =465×(ΔA+0.012)

T:反应时间,1h=1/24d; V 反总:反应体系总体积:1.625mL;W:样本质量,0.25g。

原创作者:赫澎(上海)生物科技有限公司

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