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技术文章

土壤脲酶检测试剂盒说明书(分光光度法)

点击次数:2890 发布时间:2020/9/10 9:05:11

土壤脲酶检测试剂盒说明书(分光光度法)

货号:HEPENGBIO0120

规格:50/24

产品简介:

S-UE 能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。

利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N。

试验中所需的仪器和试剂:

可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。

产品内容:

试剂一:甲苯 10ml×1 瓶,4℃保存;(自备)

试剂二:粉剂×1 瓶,临用前加入 20ml 蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;试剂三:液体 65ml×1 瓶,4℃保存;

试剂四 A 液:液体 1ml×1 瓶,4℃保存;试剂四 B 液:液体 4ml×1 瓶,4℃保存;临用前将 A 液倒入 B 液中混合,待用;4℃保存一周

试剂五:液体 5ml×1 瓶,4℃保存;

操作步骤:

1、培养

试剂名称

测定管

对照管

风干土样(g)

0.25

0.25

试剂一(μl)

125

125

振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置 15min

试剂二(μl)

625

蒸馏水(μl)

625

试剂三(μl)

1250

1250

混匀,放入 37℃水浴培养 24h 后,10000g 常温离心 10min,取上清液。

2、将培养结束的上清液稀释 10 倍(取 0.1ml 上清液,加入 0.9ml 蒸馏水)。

3、测氨量

测定管

对照管

稀释后的上清液(μl)

400

400

试剂四(μl)

80

80

试剂五(μl)

60

60

充分混匀,室温放置 20min

蒸馏水(μl)

460

460

混匀,578nm 处蒸馏水调零,测 A 值,ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。

脲酶活力的计算:

标准条件下测定的回归方程为 y=0.0915x+0.0373;x 为标准品浓度(μg/ml),y 为吸光值。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1μgNH3-N 定义为一个酶活力单位。

脲酶活力(U/g 土样)=(ΔA-0.0373)÷0.0915×10×V 反总÷W÷T=874×(ΔA-0.0373) 10:稀释倍数;T:反应时间,1d;V 反总:反应体系总体积:2ml;W:样本质量,0.25g。

原创作者:赫澎(上海)生物科技有限公司

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