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技术文章
土壤脲酶检测试剂盒说明书(分光光度法)
点击次数:2890 发布时间:2020/9/10 9:05:11
土壤脲酶检测试剂盒说明书(分光光度法)
货号:HEPENGBIO0120
规格:50/24
产品简介:
S-UE 能够水解尿素,产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。
利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1ml 玻璃比色皿、研钵、冰、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
产品内容:
试剂一:甲苯 10ml×1 瓶,4℃保存;(自备)
试剂二:粉剂×1 瓶,临用前加入 20ml 蒸馏水,充分溶解待用,4℃保存;试剂三:液体 65ml×1 瓶,4℃保存;
试剂四 A 液:液体 1ml×1 瓶,4℃保存;试剂四 B 液:液体 4ml×1 瓶,4℃保存;临用前将 A 液倒入 B 液中混合,待用;4℃保存一周
试剂五:液体 5ml×1 瓶,4℃保存;
操作步骤:
1、培养
| 试剂名称 |
| 测定管 |
| 对照管 |
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| 风干土样(g) |
| 0.25 |
| 0.25 |
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| 试剂一(μl) |
| 125 |
| 125 |
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| 振荡混匀,使土样全部湿润,室温放置 15min |
| ||
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| 试剂二(μl) |
| 625 |
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| 蒸馏水(μl) |
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| 625 |
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| 试剂三(μl) |
| 1250 |
| 1250 |
| 混匀,放入 37℃水浴培养 24h 后,10000g 常温离心 10min,取上清液。
| ||||
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2、将培养结束的上清液稀释 10 倍(取 0.1ml 上清液,加入 0.9ml 蒸馏水)。
3、测氨量
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| 测定管 | 对照管 |
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| 稀释后的上清液(μl) | 400 | 400 |
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| 试剂四(μl) | 80 | 80 |
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| 试剂五(μl) | 60 | 60 |
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| 充分混匀,室温放置 20min |
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| 蒸馏水(μl) | 460 | 460 |
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混匀,578nm 处蒸馏水调零,测 A 值,ΔA=A 测定管-A 对照管。每个测定管设一个对照管。
脲酶活力的计算:
标准条件下测定的回归方程为 y=0.0915x+0.0373;x 为标准品浓度(μg/ml),y 为吸光值。单位的定义:每天每 g 土样中产生 1μgNH3-N 定义为一个酶活力单位。
脲酶活力(U/g 土样)=(ΔA-0.0373)÷0.0915×10×V 反总÷W÷T=874×(ΔA-0.0373) 10:稀释倍数;T:反应时间,1d;V 反总:反应体系总体积:2ml;W:样本质量,0.25g。
原创作者:赫澎(上海)生物科技有限公司






