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技术文章
植物基因组DNA 提取试剂盒说明书
点击次数：2787 发布时间：2020/9/9 9:35:33
植物基因组DNA 提取试剂盒说明书
货号：HP5001
规格：50T/ 100T
保存：室温(15℃-25℃) 干燥保存，复检期 12 个月，2℃-8℃保存时间更长。
| 试剂盒内容： | HP5001-50T | HP5001-100T |
| RNase A | 1ml | 1ml×2 |
| 巯基还原剂 | 250ul | 500ul |
| 溶液 PA | 20ml | 40ml |
| 溶液 PB | 7ml | 14ml |
| 溶液 PC | 30ml | 60ml |
| 漂洗液 | 15ml | 15ml×2 |
| 洗脱液 | 15ml | 30ml |
| 吸附柱 | 50 个 | 100 个 |
| 收集管 | 50 个 | 100 个 |
| 说明书 | 1 份 | 1 份 |
产品简介：
本试剂盒采用可以特异性结合 DNA 的离心吸附柱和独特的缓冲液系统提取植物的基因组 DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料，能够效、专一吸附 DNA，可大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组 DNA 片段大，纯度，质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的植物基因组 DNA 可用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern 杂交等实验。
操作步骤：
使用前先在漂洗液中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶体上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1、植物组织预处理：取新鲜植物组织（不超过 100mg）或干重组织（不超过 20mg），于液氮中充分研磨至细粉状，让液氮自然挥发。
2、将研磨好的植物组织粉末迅速转移到预先装有 400ul 溶液 PA、20ul RNase A（10mg/ml）和 5ul巯基还原剂的离心管中，充分颠倒混匀，室温放置 10min。
3、加入 140ul 溶液 PB，充分颠倒混匀，12000rpm 离心 10min，将上清转移至新离心管中(约 400-500ul)，注意不要吸入沉淀。
4、加入和上清相同体积的溶液 PC，充分颠倒混匀，再加入和溶液 PC 相同体积的无水乙醇，此时若出现絮状物，将絮状物吹散后一起加入吸附柱中，12000rpm 离心 5min，弃废液，一次加不完可分两次加入。
注意：如果吸附柱膜呈绿色或离心时有堵塞现象，可向吸附柱中加入 600ul 无水乙醇，并适当延长离心时间。5、 向吸附柱中加入 600ul 漂洗液(请先检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm 离心 1min，弃废液，将吸附柱放回收集管。
6、向吸附柱中加入 600ul 漂洗液，12000rpm 离心 1min，弃废液，将吸附柱放回收集管中， 12000rpm 离心 2min。
7、将吸附柱置于室温或 50℃温箱放置数分钟，否则残余的乙醇可能会影响后续的实验如酶切、PCR 等。
8、将吸附柱放入一个干净的离心管中，向吸附膜中央悬空滴加 50-200ul 经 65℃水浴预热的洗脱液，室温放置
1-5min，12000rpm 离心 2min，即可得到质量的植物基因组 DNA。
9、(可选)离心所得洗脱液再加入吸附柱中，室温放置 2min，12000rpm 离心 2min。
注意事项：
1、组织应尽量选取新鲜幼嫩样本，富含多糖多酚的组织可能会提取失败，请选用多糖多酚专用试剂盒。
2、如果试剂盒中的试剂出现沉淀，可在 65℃水浴中融化，不影响使用。
3、洗脱缓冲液的体积不能小于 50ul，DNA 产物应-20℃保存。
原创作者：赫澎（上海）生物科技有限公司
