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ELISA实验常用的几种方法及仪器材料
点击次数： 37发布时间：2025/9/28 15:26:33
- 上 传 者： 上海极威生物科技有限公司
- 上传时间： 2025/9/28 15:26:33
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资料简介： ELISA实验常用的几种方法及仪器材料 ELISA常用的四种方法 1．直接法测定抗原 将抗原吸附在载体表面； 加酶标抗体，形成抗原-抗体复合物； 加底物。底物的降解量＝抗原量。 2．间接法测定抗体 将抗原吸附于固相载体表面； 加抗体,形成抗原-抗体复合物； 加酶标抗体； 加底物。 测定底物的降解量＝抗体量。 3．双抗体夹心法测定抗原 将抗原免疫种动物获得的抗体吸附于固相表面; 加抗原，形成抗原-抗体复合物; 加抗原免疫第二种动物获得的抗体，形成抗体抗原抗体复合物; 加酶标抗抗体(第二种动物抗体的抗体); 加底物。底物的降解量＝抗原量。 4.竞争法测定抗原 将抗体吸附在固相载体表面; (1)加进酶标抗原； (2),(3)加进酶标抗原和待测抗原； 加底物。对照孔与样品孔底物降解量的差＝未知抗原量。 三．ELISA常用仪器和材料 ELISA实验中需要用到的仪器耗材有以下几种： 1.聚苯乙烯微量细胞培养板。 2.酶联免疫检测仪，简称酶标仪 3.辣根过氧化物酶羊抗兔IgG,工作稀释度1:1000。 4.包被液:：0.05mol/L pH9.6碳酸缓冲液,4℃保存, Na2CO3 0.15克, NaHCO3 0.293克,蒸馏水稀释至100 ml。 5.稀释液：0.01mol/LpH7.4 PBS--Tween--20,４℃保存，NaCl 8g, KH2PO4 0.2g, Na2HPO4.12H2O 2.9g, Tween-20，0.5ml.蒸馏水加至1000ml。 6.洗涤液：同稀释液 7.封闭液：0.5%鸡卵清蛋白，pH7.4 PBS。 8.邻苯二胺溶液(底物)：临用前配制0.1M柠檬酸(2.1g/100ml), 6.1ml 0.2M Na2HPO4.12H2O (7.163g/100ml) 6.4ml,蒸馏水12.5ml,邻苯二胺10mg,溶解后,临用前加30%H2O2 40微升。 9.终止液：2mol/LH2SO4。 以上仪器耗材仅供参考，具体以产品说明书为准
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