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人分泌成分（SC）ELISA检测试剂盒技术快讯
点击次数： 78发布时间：2022/12/30 14:45:43
- 上 传 者： 上海极威生物科技有限公司
- 上传时间： 2022/12/30 14:45:43
- 文件大小： 101KB
- 文件类型： doc
- 所属分类： 应用方法
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资料简介： 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 人分泌成分（SC）ELISA检测试剂盒 使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人分泌成分（SC）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人分泌成分（SC）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。 ELISA实验样品收集、处理及保存方法： 1、血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，收集血液后，3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2、血浆：EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。 3、细胞上清液：3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4、组织匀浆：将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。 5、保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。 操作步骤 1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2.设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL； 3.待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL； 4.随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5.弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。 6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 7.每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。 试剂盒性能 1.准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。 2.灵敏度：最低检测浓度小于1.0 ng/mL。 3.特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。 4.重复性：板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。 5.贮藏：2-8℃，避光防潮保存。 6.有效期：6个月
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