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人肥大细胞类胰蛋白酶（MCT）ELISA检测试剂盒2023年新品推荐
点击次数： 73发布时间：2022/12/30 14:42:24
- 上 传 者： 上海极威生物科技有限公司
- 上传时间： 2022/12/30 14:42:24
- 文件大小： 101KB
- 文件类型： doc
- 所属分类： 应用方法
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资料简介： 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 人肥大细胞类胰蛋白酶（MCT）ELISA检测试剂盒 检测原理 试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人肥大细胞类胰蛋白酶（MCT）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人肥大细胞类胰蛋白酶（MCT）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。 【样本处理及要求】 1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 注意事项 1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3. 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间zui好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线，zui好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔di一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请zui后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6. 底物请避光保存。 7. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9. 本试剂不同批号组分不得混用。 10. 试剂盒2-8℃冷藏，保质期6个月。
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