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人白细胞介素2(IL-2)ELISA检测试剂盒资料中心
点击次数: 78发布时间:2022/12/27 13:58:44
- 上 传 者: 上海极威生物科技有限公司
- 上传时间: 2022/12/27 13:58:44
- 文件大小: 101KB
- 文件类型: doc
- 所属分类: 法规标准
- 下载次数: 1次
- 查看次数: 78
资料简介: 本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断 检测原理 试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人白细胞介素2(IL-2)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人白细胞介素2(IL-2)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 操作步骤 1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL; 3.待测样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL; 4.随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。 6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。 结果判断 绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。 试剂盒性能 1.准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。 2.灵敏度:最低检测浓度小于0.1 ng/mL。 3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。 4.重复性:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于15%。 5.贮藏:2-8℃,避光防潮保存。 6.有效期:6个月 ELISA的基本原理 ELISA即酶联免疫吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年最先应用该法进行了IgG定量测定,并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。 ELISA的基本原理是: 1)使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性; 2)使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标抗原(或抗体),而且此酶标抗原(或抗体)既保留其免疫活性,又保留其酶活性; 3)测定时将受检标本(抗体或抗原)和酶标抗原(或抗体)按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应,再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成一定比例;再加入酶反应底物后,底物被酶催化后变为有色产物,根据其颜色反应的深浅进行定性或定量分析,以了解被测标本中抗体或抗原含量。 上海极威生物科技有限公司,成立于上海,源自先进的酶联免疫技术,专业生产各类Elisa试剂盒,涵盖国内外专家的经验与智慧,深入研发更好用的Elisa试剂盒。公司采用先进的技术和设备,在确保品质的同时,降低成本,为更多有需要的研究人员,节省实验经费,保证实验质量,为国家的科技发展多做贡献。极威生物目前已经是多家生物科研基地及多家高校的合作伙伴,公司实力团队倾力打造专注于elisa试剂盒的生产,研发,助力您的科研试验!







