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人八聚体结合转录因子4试剂盒2023动态更新
点击次数： 45发布时间：2022/12/27 13:46:50
- 上 传 者： 上海极威生物科技有限公司
- 上传时间： 2022/12/27 13:46:50
- 文件大小： 101KB
- 文件类型： doc
- 所属分类： 法规标准
- 下载次数： 3次
- 查看次数： 45
资料简介： 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断 人八聚体结合转录因子4（OCT4）ELISA检测试剂盒 使用说明书 检测原理 试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人八聚体结合转录因子4（OCT4）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人八聚体结合转录因子4（OCT4）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。 试剂盒组成 名称 96孔配置 48孔配置 备注 微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无 标准品 0.3mL 0.3mL 无 样本稀释液 6mL 3mL 无 检测抗体-HRP 10mL 5mL 无 20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释 底物A 6mL 3mL 无 底物B 6mL 3mL 无 终止液 6mL 3mL 无 封板膜 2张 2张 无 说明书 1份 1份 无 自封袋 1个 1个 无 注：标准品浓度依次为：8、4、2、1、0.5、0 ng/mL. 试剂的准备 20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。 洗板方法 1. 手工洗板：甩尽孔内液体，每孔加满洗涤液，静置1min后甩尽孔内液体，在吸水纸上拍干，如此洗板5次。 2. 自动洗板机：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。 操作步骤 1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL； 3. 待测样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL； 4. 随后标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。 6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。 7. 每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
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