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ATP含量测试盒/微量法
价格：￥ 1300
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:43
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详细内容
货号：XYP9001
ATP含量测试盒说明书
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
ATP 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是生物能量通货，能荷是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定 ATP 含量并且计算能荷，能够反映能量代谢状态。
测定原理：
肌酸激酶催化肌酸和 ATP 反应生成磷酸肌酸，可在 700nm 下用磷钼酸比色法检测磷酸肌酸含量，以此反应 ATP 含量。
自备仪器和用品：
酶标仪、水浴锅、可调式移液枪、96 孔板、研钵和蒸馏水。
试剂组成和配制：
试剂一：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 2.5mL 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂二：液体 1.5mL×1 支，4℃保存；
试剂三：粉剂×1 瓶，4℃保存；临用前加入 1.2mL 蒸馏水充分溶解待用；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂四：液体 5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂五：液体 25mL×1 瓶，4℃保存；
标准液：液体 10mL×1 瓶，0.5µmol/mLATP 标准液，4℃保存；
ATP 提取：
1、组织中 ATP 的提取：称取约 0.1g 样本，加入 1mL 蒸馏水，冰浴匀浆，100℃加热提取5min，8000g 4℃ 离心 15min，取上清液待测。
2、细胞或细菌中 ATP 的提取：先收集细胞或细菌到离心管内，弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：蒸馏水（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入1mL蒸馏水），超声波破碎 1min（冰浴，强度 20％或 200W，超声 2s，停 1s），8000g 4 ℃离心15min；取上清液待测。
3、血清（浆）中 ATP 的提取：取约 0.1mL 血清（浆），加入 1mL 蒸馏水，冰浴匀浆，100℃加热提取 5min，8000g 4℃ 离心 15min，取上清液待测。
测定步骤：
1、酶标仪或分光光度计预热 30 min 以上，调节波长到 700nm，蒸馏水调零。
2、显色剂的配制：临用前请根据拟用显色剂体积（样本数×0.2 m L），按试剂四(mL)：试剂五（mL）=1：5 的比例配制。用多少配多少。
3、样本测定：
注意：空白管和标准管通常只需要各做一个。
ATP 含量计算：
1、血清（浆）中 ATP 含量计算
ATP 含 量 (µmol/mL)=[C 标 准 管 ×(A 测 定 管 － A 空 白 管 )÷(A 标准管－A空白管) ×V1]÷(V3×V1÷V2)=5×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)
2、组织、细菌或细胞中 ATP 含量计算
（1）按蛋白浓度计算
ATP 含 量 (µmol/mg prot)=[C 标 准管 ×(A 测 定管 －A 空 白管 )÷(A 标准管－A空白管) ×V1]÷(V1÷Cpr）=0.5×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷Cpr
蛋白质含量需要另外测定。
（2）按样本鲜重计算
ATP 含 量(µmol/g 鲜 重)=[C 标 准 管 ×(A 测 定 管 －A 空 白 管)÷(A 标准管－A空白管) ×V1]÷(W×V1÷V2)=0.5×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)÷W（3）按细菌或细胞密度计算
ATP 含量(µmol/104 cell）=[C 标准管×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A空白管) ×V1]÷(500×V1÷V2)=0.001×(A 测定管－A 空白管)÷(A 标准管－A 空白管)
C 标准管：标准液浓度，0.5µmol/mL；V1：加入反应体系中样本体积，0.01mL；V2：加入提取液体积，1mL；V3：加入血清（浆）体积：0.1mL；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：细胞或细菌总数，500 万。
注意：最低检测限为 10nmol/mL 或 10nmol/g 鲜重或 0.1nmol/mg prot
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
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