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Na+k+ ——ATP酶测试盒/分光光度法
价格：￥ 218
品牌名称：$brandModel.Title型号： 原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/15 11:08:43
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详细内容
货号：XYP9007
Na+K+ ——ATP酶测试盒说明书
注 意 :正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定
测定意义:
Na+K+- ATP 酶广泛分布于植物、动物、微生物和细胞中,可催化 ATP 水解生成 ADP 和无机磷。
测定原理:
Na+K+-ATP 酶分解 ATP 生成 ADP 及无机磷,通过测定无机磷的量来确定 ATP 酶活性。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
试剂的组成和配制:
提取液：液体 50mL×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。
试剂二：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂三：液体 5ml×1 瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×3 支，-20℃保存。用时每支加 1mL 蒸馏水；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
试剂五：液体 5mL×1 瓶，4℃保存。
试剂六：粉剂×1 瓶，4℃保存。用时加入 3mL 蒸馏水， 4℃保存。
试剂七：粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入 25mL 蒸馏水，溶解后 4℃保存一周。
试剂八：粉剂×1 瓶, 4℃保存。用时加入 25mL 蒸馏水，溶解后 4℃保存一周。
试剂九： 液体 25mL×1 瓶，室温保存。
试剂十：10mmol/L 标准磷贮备液 10mL×1 瓶，4℃保存。
0.5µmol/mL 标准磷应用液配制：将贮备液 20 倍稀释，即取 0.1mL 试剂十加 1.9mL 蒸馏水充分混匀。
定磷剂的配制：按 H2O: 试剂七:试剂八:试剂九=2:1:1:1 的比例配制，配好的定磷剂应为浅黄色。若无色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，定磷剂现用现配。
样品酶液的制备:
1、细菌、细胞或组织样品的制备:
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、血清(浆)样品:直接检测。
操作步骤:
1、分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 660nm,蒸馏水调零。
2、酶促反应(在 EP 管中加入下列试剂)
注意:
1、由于每一个样都必须做对照,本试剂盒 50 管保证测 24 份 Na+K+-ATP 酶。
2、此法具有微量、灵敏、快速的特点。所以对测定所用试管要求严格无磷。
3、空白管和标准管只要做一管。
计算 :
C 标准管：标准管浓度，0.5µmol/mL；V 总：酶促反应总体积，0.5mL；V 样：加入样本体积，0.2mL ；V 样总：加入提取液体积，1mL；T：反应时间，1/6 小时；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g；500：细菌或细胞总数，500 万。
仅用于科研，不能用于临床诊断！所有产品仅供科研使用，不得用于人或动物的治疗等任何其他用途，不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准，网站说明书仅供参考。
热门标签：Na+k+,——ATP酶,Na+k+,——ATP酶测试盒,分光光度法
