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铜蓝蛋白(Cp)含量测试盒/微量法
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详细内容
铜蓝蛋白(Cp)含量测试盒说明书
注 意:正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:
铜蓝蛋白是血浆的含铜蛋白,有运输铜的功能,同时具有氧化酶的活性,是细胞外液重要的抗氧化剂。
测定原理:
铜蓝蛋白催化 3,3’,5,5’-四甲基联苯胺生成蓝色产物,在 645nm 处有特征吸收峰,依此可得铜蓝蛋白活性。
自备实验用品及仪器:
天平、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板和蒸馏水。
试剂组成和配制:
试剂一:液体 10mL×1 瓶,4℃保存。
试剂二:液体 7mL×1 瓶,4℃保存。
试剂三:液体 15mL×1 瓶,4℃避光保存。(使用前 37℃预热)
样本前处理:
1、 血清(浆)等液体样本:直接检测。
2、 动植物组织样本:称取约 0.1g 组织,加入 1mL 蒸馏水,进行冰浴匀浆。10000g ,4℃离心 10min,取
上清,置冰上待测。
测定操作表:
1、 分光光度计/酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 645nm,蒸馏水调零。
2、 操作表

计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1.按体积计算
酶活定义:37℃条件下, 每分钟每毫升样品与底物作用吸光度升高 0.01 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/mL)=ΔA×V 反总÷0.01÷V 样÷T = 33.33×ΔA
2.按鲜重计算
单位定义:37℃条件下,每分钟每克样品与底物作用吸光值升高 0.01 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/g 鲜重)=ΔA×V 反总÷0.01÷(W×V 样÷V 样总)÷T = 33.33×ΔA÷W
3.按蛋白浓度计算
单位定义:37℃条件下,每分钟每毫克蛋白样品与底物作用吸光值升高 0.01 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/ mg prot)=ΔA×V 反总÷0.01÷(Cpr×V 样)÷T = 33.33×ΔA÷Cpr
V 样:0.03 mL;V 反总:0.3 mL;T:反应时间,30min;V 样总:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白
质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
b. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
1、 按体积计算
酶活定义:37℃条件下, 每分钟每毫升样品与底物作用吸光度升高 0.005 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/mL)=ΔA×V 反总÷0.005÷V 样÷T = 66.66×ΔA
2、 按鲜重计算
单位定义:37℃条件下,每分钟每克样品与底物作用吸光值升高 0.005 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/g 鲜重)=ΔA×V 反总÷0.005÷(W×V 样÷V 样总)÷T = 66.66×ΔA÷W
3、 按蛋白浓度计算
单位定义:37℃条件下,每分钟每毫克蛋白样品与底物作用吸光值升高 0.005 为一个酶活单位。
Cp 活力(U/ mg prot)=ΔA×V 反总÷0.005÷(Cpr×V 样)÷T = 66.66×ΔA÷Cpr
V 样:0.03 mL;V 反总:0.3 mL;T:反应时间,30min;V 样总:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白
质浓度,mg/mL;W:样本质量,g
注意事项:
试剂二和试剂三有一定的毒性和刺激性,请操作时做好防护措施。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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