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维生素E(Vitamin E)测试盒/比色法
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详细内容
货号:XYP9093016
维生素E(Vitamin E)测试盒说明书
一、试剂组成及配制:
12µg/mlVE 标准应用液配制:取 1mg/ml 的 VE 标准品贮备液 0.12ml 加无水乙醇定容至 10ml,即为 12
g/ml 的 VE 标准品应用液。
[ 注 ] :2~8℃密封保存,有效期 3 个月。
二、适用范围:
本试剂盒适用于检测动物血清(浆)、组织和植物等中 VE 的含量。
三、操作步骤:
(一)、血清(浆)中维生素 E 的测定:
1、血清(浆)正庚烷维生素 E 的抽提:
旋涡混匀(充分抽提)1 分钟,然后 3000~4000 转/分,离心 5~10 分钟。
[ 注 ]:观察试管内液分为三层,最上层为正庚烷维生素 E 抽提液,第二层为水及无水乙醇,最下层为蛋
白沉淀物。
2、显色反应:

(二)、组织中维生素 E 的测定:
1、样本前处理:
10%组织匀浆的制备:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例加入试剂四组织匀浆介质,冰水浴条件下匀浆,2500 转/分离心 10 分,取上清待测。
3、组织匀浆中正庚烷维生素 E 的抽提:


旋涡混匀(充分抽提)1 分钟,然后 3000~4000 转/分,离心 5~10 分钟。
[ 注 ]:观察试管内液分为三层,最上层为正庚烷维生素 E 抽提液,第二层为水及无水乙醇,最下层为蛋白沉淀物。
3、显色反应:

四、测定意义:
维生素 E(VE)是天然脂溶性抗氧化剂,它存在细胞膜性结构中(细胞膜、线粒体、微粒体)以及脂肪细
胞的脂滴和循环的脂蛋白中。
VE 不但是单线态氧和超氧阴离子自由基的清除剂,更重要的是脂质过氧化作用的阻断剂。从细胞水平的许
多实验说明维生素 E 和 SoGSHPX 协同地保护细胞免受脂质过氧化损伤。VE 尚能直接与蛋白硫自由基偶
联,使蛋白巯基恢复活性,VE 也可通过清除 LOO 间接地防止蛋白巯基丧失。而蛋白巯基是维护细胞生存的
重要环节,因而 VE 是机体抗氧化的道防线。当维生素 E 缺乏时,机体易受到自由基的攻击而表现出
各种病理状态。例如:老年性白内障、早衰等。
五、测定原理:
VE 在菲罗啉的存在下,可使三价铁离子还原成二价铁离子,后者在特定的环境下可与菲罗啉形成粉红色复
合物,通过比色,在标准曲线上可查出 VE 的含量,或者通过公式可计算出 VE 的含量。
六、注意事项:
1、试管要用肥皂粉或洗涤净煮开刷洗,再用自来水冲洗干净后双蒸水冲洗一遍。
2、2 号试剂应用液当天配制,需多少配多少。
3、显色时间 5 分钟,要准确。
4、维生素 E 的抽提时间 1 分钟要充分。
5、因本法为微量测定,故每换一次移液尖,吸液要丢弃,以后每次加样或加试剂均要垂直滴入,切勿加在管壁上。
6、吸取正庚烷抽提液时,一定要小心吸取,不可将第二层(即水与无水乙醇液相层)混入,否则会影响吸光值。
7、显色所用试管要干燥。
8、本试剂盒仅用于科研、实验室。
仅用于科研,不能用于临床诊断!所有产品仅供科研使用,不得用于人或动物的治疗等任何其他用途,不为任何个人提供产品和服务。以实际收货产品说明书为准,网站说明书仅供参考。
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